姜黃素對人食管癌EC-9706細(xì)胞的影響.pdf

1、目的：
　　 食管癌是世界上常見的十種惡性腫瘤之一，我國是食管癌高發(fā)區(qū)，食管癌的發(fā)病率僅次于胃癌而居消化道腫瘤發(fā)病率的第二位。對于食管癌的防治研究工作及采取有效的預(yù)防措施是人們更為關(guān)注的研究課題。因此，探索有效的方法對降低食管癌的發(fā)病率及死亡率極其重要。
　　 食管癌的確切發(fā)病機(jī)制不清。手術(shù)治療仍然是目前治療食管癌的最有效方法，但食管癌早期癥狀不明顯，臨床確診的患者多已處于中晚期，大多失去手術(shù)治療機(jī)會?；熞簿统蔀橹委熓?/p>

2、管癌的重要手段?；熕幬锒靖弊饔么?，而中藥姜黃素毒副作用小，價(jià)格相對較便宜，有著廣大的發(fā)展前景入選本實(shí)驗(yàn)。姜黃素的抗癌機(jī)制不是十分清楚。本研究探討的是：姜黃素抑制人食管癌EC-9706細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡及其抑制BAG-1，HSP70、HSP27mRNA表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用MTT、FCM及RT-PCR三種實(shí)驗(yàn)技術(shù)，觀察姜黃素對人食管癌EC-9706細(xì)胞增殖、凋亡和其基因表達(dá)的影響，為進(jìn)一步探討姜黃素對食管癌作用機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)范例。
　

3、　 材料和方法：
　　 將EC-9706細(xì)胞株置于37℃，飽和濕度5％CO2的常規(guī)條件下培養(yǎng)，待細(xì)胞進(jìn)入對數(shù)生長期后用于實(shí)驗(yàn)。
　　 1采用MTT法檢測藥物對細(xì)胞的生長抑制作用。
　　 2流式細(xì)胞儀(FCM)測定細(xì)胞凋亡率。
　　 3RT-PCR法檢測BAG-1、HSP70和HSP27mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1實(shí)驗(yàn)分三組：對照組；DMSO組；(50、100、150、200μ

4、mol/L)姜黃素組；分別干擾EC-9706細(xì)胞12h、24h、48h后，Mrr結(jié)果表明姜黃素能明顯抑制EC-9706細(xì)胞的增殖，并呈劑量和時(shí)間依賴性。溶劑對細(xì)胞生長無明顯影響(P＞0.05)。
　　 2FCM顯示出現(xiàn)典型的亞二倍體峰即凋亡峰。100、150和200μmol/L姜黃素作用EC-9706細(xì)胞24h后的凋亡率分別為（9.95±1.80）％、(14.58±2.80)％和(40.46±5.87)％，與對照組（1.82±0

5、.42）％相比較，有顯著性差異(P＜0.05)。藥物作用48h后，凋亡率分別為(17.64±1.75)％、(38.22±3.09)％和(48.48±5.56)％，與對照組(2.05±0.48)％相比較，有顯著性差異（P＜0.05），說明EC-9706細(xì)胞凋亡率與姜黃素作用呈劑量和時(shí)間依賴關(guān)系。
　　 3姜黃素作用EC-9706細(xì)胞24h和48h后，BAG-1、HSP70及HSP27mRNA表達(dá)水平隨著姜黃素濃度和作用時(shí)間的延長而