大黃對腹腔感染致急性肺損傷大鼠的保護(hù)作用.pdf

1、近年來國內(nèi)外許多學(xué)者都在積極探索預(yù)防和治療ALI和ARDS的有效方法,但到目前為止對于LI和ARDS仍無特效療法.許多動物實(shí)驗證明抗腫瘤壞死因子(TNF)抗體及可溶性TNF受體均可抑制TNF介導(dǎo)的肺損傷,但臨床應(yīng)用有潛在的危險性,因為TNF是介導(dǎo)宿主正?？刮⑸锩庖叻烙磻?yīng)的重要物質(zhì),阻斷其生物活性必然會影響機(jī)體的免疫功能,使各類危重病患者發(fā)生院內(nèi)感染的機(jī)會增加,后者則是導(dǎo)致危重病患者死亡的一個重要原因.材料與方法1.實(shí)驗分組及模型制備

2、采用健康、性成熟Sprague-Dawley大鼠30只,雌雄不限,體重250~350g,于浙江中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗動物中心以清潔級喂養(yǎng).大鼠隨機(jī)分成三組(A、B和C組),每組10只大鼠,A組為正常對照組;B組為肺損傷組;C組為大黃治療組.所有大鼠實(shí)驗開始前12h禁食不禁水.B組和C組每只大鼠按鹽酸氯胺酮100mg/kg腹腔注射麻醉后,開腹找到盲腸,用18號針穿孔造成腹腔感染.其后,將盲腸放回腹腔,縫合腹部切口.C組每只大鼠按200mg/kg劑量

3、,以10﹪生大黃液(浙江省中醫(yī)院提供)烯釋至1ml于術(shù)后即刻、12h、24h、36h共四次灌胃給予;A組和B組以生理鹽水1ml于術(shù)后即刻、12h、24h、36h共四次灌胃給予.2.實(shí)驗觀察指標(biāo)及檢測方法于術(shù)后48h每只大鼠按氯胺酮100mg/kg腹腔注射麻醉,然后按20mg/kg尾靜脈注射1﹪伊文思藍(lán)液,同時記錄時間.30min后打開胸腔,暴露心肺,右心抽血處死動物.結(jié)扎右支氣管,取右肺分別作濕肺標(biāo)本、肺毛細(xì)血管通透性標(biāo)本和病理標(biāo)本.按

4、照每次1ml灌洗液量進(jìn)行支氣管肺泡灌洗5次,回收灌洗液,作BALF細(xì)胞分類.(1).一般情況:實(shí)驗中常規(guī)觀察各組大鼠的精神狀態(tài)、活動情況、進(jìn)食、大便等情況.(2).肺毛細(xì)血管通透性的檢測:取肺組織浸泡在甲酰胺分析純中,溫箱中溫育后取出組織,離心后取上清液,于分光光度計在620nm和740nm下測吸光度值,樣正公式為:E620evans=E620-(1.426×E740+0.030).根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出伊文思藍(lán)液濃度,再計算出肺組織中伊文思

5、藍(lán)的含量.(3).BALF細(xì)胞分類計數(shù)的檢測:BALF離心后取沉淀物涂片,染色,按其形態(tài)特征進(jìn)行分類計數(shù),求出各類細(xì)胞所占比值.(4).肺組織濕重與干重比值的檢測:取肺組織濾紙吸干表面液體,稱濕重;然后置于80℃干燥箱烘干48h去除水分,再稱干重,計算濕干重比值.(5).病理組織學(xué)檢查:取肺組織病理標(biāo)本,經(jīng)10﹪甲醛固定,石蠟包埋切片,HE染色后,用普通光學(xué)顯微鏡觀察.同時觀察肺標(biāo)本大體外觀和腹腔感染情況.統(tǒng)計學(xué)處理:數(shù)據(jù)用X±S表示.

6、數(shù)據(jù)先進(jìn)行方差齊性檢驗.若方差齊,則組間差異顯著性采用單因素方差分析,兩兩比較采用Newman-Keuls檢驗.若方差不齊,則通過變量變換使方差齊,再按上述方法進(jìn)行方差分析.結(jié)論以生大黃液灌胃治療腹腔感染致ALI大鼠,發(fā)現(xiàn)大黃能降低腹腔感染致ALI后肺毛細(xì)血管通透性、肺濕干重比值、BALF中中性粒細(xì)胞百分率,并能明顯改善腹腔感染致ALI后肺間質(zhì)水腫、肺出血、肺不張等病理變化.但大蓼對腹腔感染的病情變化無明顯影響.綜上所述,大黃對腹腔感染