骨髓間充質(zhì)干細胞免疫調(diào)節(jié)作用的機制與應用研究.pdf

1、本文研究工作分為兩部分： 第一部分：目的：研究間充質(zhì)干細胞(MSCs)和全骨髓細胞治療免疫介導再生障礙性貧血(從)小鼠的療效比較。 方法：建立BALB/C小鼠免疫介導再生障礙性貧血模型，觀察MSCs和全骨髓細胞對動物模型的療效，包括記錄一般情況變化、血常規(guī)檢查、骨髓切片眥染色，流式細胞術(shù)檢測治療后小鼠外周血和脾臟的CD4+、CD8+T淋巴細胞。 結(jié)果：①觀察AA模型小鼠至第20天，對照組全部死亡(6/6)；MSC

2、s組4例死亡(4/8)；全骨髓細胞組1例死亡(1/8)。②MSCs組和全骨髓細胞組存活小鼠，其體重變化趨勢、血細胞計數(shù)、骨髓造血功能恢復均無明顯差異。③檢測MSCs組和全骨髓細胞組脾臟CD4+T細胞、CD8+T細胞、CD4+/CD8+的比值示無差異，與正常小鼠相比，MSCs組外周血CD4+T細胞、CD8+T細胞水平有下降趨勢。全骨髓細胞組CD8+T細胞水平明顯下降。 結(jié)論：單獨使用MSCs治療能夠使部分AA小鼠癥狀改善、造血恢復

3、。MSCs治療有效率不如全骨髓細胞，但兩組治療有效者一般狀況改善、恢復造血、T淋巴細胞亞群分布無明顯差異。MSCs有一定的臨床應用價值。 第二部分：目的：探討白細胞介素23(IL-23)在白血病患者中的表達規(guī)律以及人骨髓來源間充質(zhì)干細胞(MSCs)對IL-23和TGF-β 1表達的影響。 方法：運用實時定量PCR方法，檢測20例急性髓系白血病患者、10例急性淋巴細胞白血病患者、10例慢性粒細胞白血病患者和10例正常對照中

4、骨髓單個核細胞IL-23 p19 mRNA的表達水平。檢測20例急性白血病患者(10例AML、10例ALL)骨髓單個核細胞原代培養(yǎng)及其與MSCs共培養(yǎng)后IL-23p19、TGF-β 1 mRNA的表達水平。用ELISA方法檢測急性白血病患者血漿、骨髓上清，正常對照血漿中IL.23含量；檢測骨髓單個核細胞原代培養(yǎng)上清中以及與MSCs共培養(yǎng)后上清中IL-23含量。 結(jié)果：急性髓系白血病、急性淋巴細胞白血病、慢性粒細胞白血病患者骨髓單

5、個核細胞IL-23p19 mRNA的表達水平與正常對照相比無統(tǒng)計學差異，三者之間也無統(tǒng)計學差異(P>0.05)；急性白血病患者骨髓單個核細胞與MSCs共培養(yǎng)后IL-23p19 mRNA的表達水平降低，但尚未達到有統(tǒng)計學差異(P>0.05)，TGF-β1 mRNA表達水平無明顯差異(P>0.05)。急性白血病患者血漿、骨髓上清IL-23水平與正常對照組相比無統(tǒng)計學差異。骨髓單個核細胞和MSCs共培養(yǎng)上清中IL-23水平下降，有統(tǒng)計學差異(