三氧化二砷對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞系ER-α基因去甲基化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文三氧化二砷對(duì)MDAMB231細(xì)胞系ERα基因去甲基化的實(shí)驗(yàn)研究姓名：劉劍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：王留興陸士新20070501鄭州大學(xué)2007年碩1：學(xué)位論文三氧化二砷對(duì)MDAMB231細(xì)胞系ER‘x基因去甲接化的實(shí)驗(yàn)研究72小時(shí)。以不加藥同期培養(yǎng)的MDAMB231細(xì)胞作為陰性對(duì)照。以同期培養(yǎng)在RPMI1640環(huán)境中的雌激素受體(ER)陽性人乳腺癌細(xì)胞株MCF7為陽性對(duì)照。(2)采用REPPCR方法檢測

2、ERa基因外顯子I(含過度甲基化的CpG島)的表達(dá)。(3)采用WesternBlot技術(shù)檢測經(jīng)不同濃度As203處理后的MDAMB231細(xì)胞ERct蛋白的表達(dá)情況。(4)MITr技術(shù)檢測不同濃度As203處理后的MDAMB231細(xì)胞，再經(jīng)他莫昔芬處理，各組細(xì)胞增殖抑制率的差異。(5)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)SPSSll0統(tǒng)計(jì)軟件處理，采用單因素方差分析，以a=005為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)。：結(jié)果：(1)REP—PCR法檢測未經(jīng)As203處理的MDA。MB2

3、3l細(xì)胞在經(jīng)NotI酶過量消化前后，均可擴(kuò)出清晰的外顯子I片段，提示ER一旺基因甲基化陽性；一定濃度(20／amol／L和409mol／L)的As203作用72小時(shí)后，再次酶切后擴(kuò)增未見目的條帶，提示ERa基因甲基化陰性；以MCF7細(xì)胞為陽性對(duì)照，經(jīng)Notl酶過量消化后也未擴(kuò)增出ERa基因外顯子I片段。(2)經(jīng)WesternBlot檢測未經(jīng)As203處理的MDAMB231細(xì)胞未顯示ERa蛋白帶，O5ltmol／LAs203處理的MDAM