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文檔簡介
1、目的:研究孕期及哺乳期母鼠鐵補(bǔ)充對仔鼠鐵負(fù)荷以及神經(jīng)反射和學(xué)習(xí)記憶能力的影響及其相關(guān)機(jī)制。
方法:將受孕第0日孕鼠隨機(jī)分為三組:正常對照組(對照組,NC)、低劑量鐵補(bǔ)充組(低鐵組,LIS)和高劑量鐵補(bǔ)充組(高鐵組,HIS),每組10只,單籠飼養(yǎng),自由進(jìn)食全價(jià)顆粒飼料(含鐵量為370 mg/kg),自由飲用去離子水。自妊娠第l日開始對孕鼠進(jìn)行鐵干預(yù),腹腔注射右旋糖酐鐵(低鐵組、高鐵組劑量分別為30 mg/kg·bw、120 mg
2、/kg·bw,注射前用生理鹽水將每只孕鼠所需右旋糖酐鐵注射液稀釋至2 ml),對照組腹腔注射生理鹽水2 ml,每2日注射1次,直至仔鼠斷乳。仔鼠出生后連續(xù)5w每周稱量仔鼠體重,應(yīng)用懸崖回避、平面翻正、負(fù)趨地性實(shí)驗(yàn)等測定仔鼠的神經(jīng)反射功能,應(yīng)用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)測定仔鼠學(xué)習(xí)記憶能力。水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對仔鼠進(jìn)行麻醉,斷頭取血,全血靜置30 min,3000 r/min離心10 min,取上清,于-20℃凍存;迅速剝離全腦組織,置于冰冷生
3、理鹽水中漂洗,濾紙拭干后稱重,于-80℃凍存。應(yīng)用血清鐵試劑盒測量仔鼠血清鐵含量,應(yīng)用組織鐵試劑盒測量仔鼠腦組織鐵含量,應(yīng)用乙酰膽堿酯酶、一氧化氮合酶試劑盒分別檢測仔鼠腦組織勻漿中乙酰膽堿酯酶(AchE)、一氧化氮合酶(NOS)活力。
結(jié)果:高鐵組仔鼠血清鐵含量為61.87μmol/L,顯著高于對照組仔鼠的38.34μmol/L和低鐵組仔鼠的38.45μmol/L(P均<0.05),低鐵組和對照組血清鐵含量無差異(P>0.05
4、)。高鐵組仔鼠腦組織鐵含量3.28μmol/gprot,顯著高于對照組仔鼠的1.84μmol/gprot(P<0.05);低鐵組仔鼠腦組織鐵含量(2.46μmol/gprot)與對照組相比無差異(P>0.05)。高鐵組仔鼠的出生體重與對照組有顯著差異(P<0.05),低鐵組仔鼠出生體重與對照組仔鼠相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。自哺乳期至出生35 d,高鐵組仔鼠體重顯著低于對照組仔鼠,出生第7 d至35 d低鐵組仔鼠體重也低于對
5、照組仔鼠(P<0.05),出生21 d開始,高鐵組仔鼠體重低于低鐵組仔鼠。神經(jīng)反射試驗(yàn)結(jié)果:負(fù)趨地性試驗(yàn)中,高鐵組仔鼠的平均達(dá)標(biāo)日齡為8.60 d,顯著高于對照組仔鼠的6.40 d和低鐵組仔鼠的5.40 d(P均<0.05),低鐵組仔鼠與對照組仔鼠相比無差異(P>0.05);懸崖回避試驗(yàn)中,高鐵組仔鼠的平均達(dá)標(biāo)日齡為6.90 d,顯著高于對照組仔鼠的3.60 d和低鐵組仔鼠的3.30 d(P均<0.05),低鐵組仔鼠與對照組仔鼠相比無差
6、異(P>0.05);平面翻正試驗(yàn)中,高鐵組仔鼠平均達(dá)標(biāo)日齡為6.10 d,顯著高于對照組仔鼠的3.90 d和低鐵組仔鼠的2.70 d(P均<0.05),且低鐵組仔鼠平均達(dá)標(biāo)日齡顯著低于對照組仔鼠(P<0.05)。Morris水迷宮檢測學(xué)習(xí)記憶能力實(shí)驗(yàn)結(jié)果:定位航行實(shí)驗(yàn)中,訓(xùn)練的第2日,高鐵組仔鼠平均逃避潛伏期為37.80 s,顯著長于對照組仔鼠的26.32 s(P<0.05),但與低鐵組仔鼠的31.93 s相比無差異(P>0.05)。訓(xùn)
7、練的第5日,高鐵組仔鼠平均逃避潛伏期為23.76 s,顯著長于對照組仔鼠的15.77 s和低鐵組仔鼠的12.09 s(P均<0.05)??臻g探索實(shí)驗(yàn)中,三組仔鼠的游泳速度無差異(P>0.05),穿越平臺次數(shù)無差異(P>0.05)。高鐵組仔鼠腦組織勻漿中AchE活力為0.18μmol/gprot顯著高于對照組仔鼠的0.14μmol/gprot(P<0.05),但與低鐵組仔鼠的AchE活力(0.17μmol/gprot)相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意
8、義(P>0.05)。高鐵組仔鼠腦組織勻漿中NOS活力為1.09μmol/gprot顯著低于對照組仔鼠的1.53μmol/gprot(P>0.05),但與低鐵組仔鼠的NOS活力(1.20μmol/gprot)相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
結(jié)論:孕期及哺乳期母鼠鐵過量補(bǔ)充可影響仔鼠生長發(fā)育,損傷其神經(jīng)反射功能,并且對仔鼠的學(xué)習(xí)記憶能力也可產(chǎn)生不良影響。仔鼠腦組織鐵含量過高及AchE活力升高、NOS活力下降可能是導(dǎo)致其學(xué)
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