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1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文研究SGT蛋白在小鼠腦發(fā)育過程中的表達(dá)姓名:宋玲申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:張英20070410復(fù)旦大學(xué)2007屆碩士研究生畢業(yè)論文中文摘要第一部分小鼠腦發(fā)育過程中SGT蛋白的表達(dá)研究SGT(smallglutaminedchtetratticopepfiderepeat(TPR)containingprotein)是含有TPR基序的蛋白家族中的一種新的細(xì)胞性蛋白分子,有文獻(xiàn)報道,SGT能夠
2、作為一種共分子伴侶蛋白分子和促凋亡因子而發(fā)揮重要功能。SGT蛋白結(jié)構(gòu)中含有三個串聯(lián)的TPR結(jié)構(gòu)域,每一個TPR基序都是由34個氨基酸序列組成。含有TPR結(jié)構(gòu)域的蛋白分子能夠參與介導(dǎo)一系列的生物學(xué)活動,這其中包括細(xì)胞周期調(diào)控,轉(zhuǎn)錄抑制,線粒體和過氧化物蛋白轉(zhuǎn)運以及神經(jīng)發(fā)生等。有研究顯示,SGT能夠通過和Hsc70(熱休克同源蛋白70)以及CSP(半胱氨酸鏈蛋白)在突觸囊泡的表面形成一種三元復(fù)合物而可能對神經(jīng)遞質(zhì)的釋放機制產(chǎn)生一定的影響,但
3、SGT蛋白在小鼠腦發(fā)育過程中的表達(dá)以及該蛋白對于腦發(fā)育的影響還未曾報道。在本次實驗研究中,我們以從孕17天(E17)開始到成年期10周(10w)整個發(fā)育階段的小鼠全腦以及從出生后到成年(1W到8W)的海馬、皮層、小腦和紋狀體作為樣本,采用realtimePCR、Westernblot以及免疫組化等實驗方法,研究了SGT蛋白在相應(yīng)發(fā)育階段的表達(dá)情況。實驗數(shù)據(jù)顯示,SGT的蛋白水平在孕晚期直至出生后一段時期較高,從4W開始至成年,表達(dá)水平呈
4、現(xiàn)下降趨勢。SGT的mRNA在整個發(fā)育階段的變化趨勢與蛋白相似。SGT蛋白在海馬、皮層、小腦和紋狀體這四個腦分區(qū)中的表達(dá)情況基本與全腦中的表達(dá)模式類似。免疫組化技術(shù)分析了SGT蛋白的亞細(xì)胞定位,發(fā)現(xiàn)SGT在海馬的CAl3區(qū)域表達(dá)較高。在皮層和紋狀體的大部分神經(jīng)元中都能檢測到SGT的陽性染色,在小腦中,SGT主要分布在浦肯野(氏)細(xì)胞中。SGT蛋白在小鼠腦發(fā)育過程中的表達(dá)模式提示SGT可能對于小鼠的腦中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育產(chǎn)生一定的影響。關(guān)鍵
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