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1、目的:本實驗擬研究人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)分離、培養(yǎng)與鑒定的方法,觀察其成骨細(xì)胞表型特征,探討其作為牙周組織工程種子細(xì)胞的可行性;將Bio-gide膠原膜與hMSCs進行體外復(fù)合培養(yǎng),行形態(tài)學(xué)觀察。 方法:體外分離培養(yǎng)hMSCs,進行形態(tài)學(xué)觀察,增殖測定,細(xì)胞表面抗原檢測;取生長狀態(tài)的良好的第三代hMSCs,分別于不同培養(yǎng)條件下(實驗組:成骨誘導(dǎo)液;對照組:普通培
2、養(yǎng)液)進行培養(yǎng),檢測細(xì)胞堿性磷酸酶表達(dá)及礦化能力。將hMSCs與Bio-gide膠原膜進行體外復(fù)合培養(yǎng),通過倒置相差顯微鏡,掃描電鏡進行觀察。 結(jié)果:梯度密度離心法結(jié)合貼壁篩選法能獲得高純度高活性的hMSCs。經(jīng)成骨誘導(dǎo)后可表達(dá)高水平堿性磷酸酶活性(p<0.05),連續(xù)培養(yǎng)28天左右可形成礦化結(jié)節(jié)。hMSCs可在Bio-gide膠原膜上貼附增殖,并復(fù)層生長。 結(jié)論:hMSCs 取材方便、創(chuàng)傷?。痪哂谐晒欠只瘽撃?,經(jīng)誘導(dǎo)后
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