EB病毒、幽門螺桿菌感染與胃癌的關(guān)系及Eb病毒致胃癌機(jī)制的研究.pdf

1、目的：探討EB病毒，H.pylori cagA基因、vacA基因在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用及三者的關(guān)系，及EB病毒對體外培養(yǎng)的胃上皮細(xì)胞增值和凋亡的影響。 方法：①以病理活檢確診的胃癌病人46例為實(shí)驗(yàn)組，以癌前狀態(tài)（包括慢性萎縮性胃炎、胃潰瘍、腸化生、異型增生等）病人43例為對照組，胃鏡下取組織，采用PCR體外擴(kuò)增方法，檢測胃癌組織及癌前狀態(tài)組織中EBV—DNA，用快速尿素酶試驗(yàn)檢測H.pylori，陽性病人做PCR體外擴(kuò)增，陽性者

2、用PCR法進(jìn)行H.pylori cagA和vacA基因檢測，進(jìn)行基因分型。②體外培養(yǎng)B95—8到一定數(shù)量后，提取EBV，分裝后，—70℃保存?zhèn)溆?。③胃上皮?xì)胞SGC—7901細(xì)胞培養(yǎng)后爬片，以EBV濃度3.5×102/ml，3.5×103/ml，3.5×104/ml作用48h后，采用SABC方法檢測SGC—7901細(xì)胞中ki—67表達(dá)的變化。④體外培養(yǎng)胃上皮細(xì)胞SGC—7901，以3×104/ml接種培養(yǎng)好的細(xì)胞在六孔板，培養(yǎng)24小時(shí)后

3、，加入EBV，分三個(gè)濃度組：3.5×102/ml，3.5×103/ml，3.5×104/ml，培養(yǎng)48h后，分別制成單細(xì)胞懸液，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率。 結(jié)果：①89例標(biāo)本組織中有12例EB病毒陽性，總陽性率為14.4%（12/89），其中，實(shí)驗(yàn)組陽性率21.7%（10/46），對照組4.7%（2/43），而相應(yīng)的癌旁組織中均未檢測到EB病毒感染，實(shí)驗(yàn)組與對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2=5.56，P<0.05）。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明E

4、BvaGC（EBV associated gastric carcinoma，EBVaGC）和EBVnGC（EBV negativegastric carcinoma，EBVnGC）在年齡、腫瘤分化程度方面差異無顯著性，P>0.05，而在性別方面有顯著差異（X2=3.93，P<0.05），男性EBV陽性率高于女性。②等級(jí)統(tǒng)計(jì)分析表明，EBV感染與慢性萎縮胃炎→胃潰瘍→腸化生→高中低分化胃癌演變過程中呈正相關(guān)（r=0.25465p=0.0

5、160）③實(shí)驗(yàn)組H.pylori陽性率60.9%（28/46），對照組H.pylori陽性率37.2%（16/43），實(shí)驗(yàn)組與對照組用X2檢驗(yàn)，X2=4.98，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。④實(shí)驗(yàn)組與對照組中H.pylori cagA和vacA基因的檢出情況用X2檢驗(yàn)（X2=5.42，P<0.05； X2=3.97，P<0.05），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑤H.pylori、H.pylori cagA、vacA基因陽性和陰性在性別、年齡差

6、異無顯著性（P>0.05），但在腫瘤分化程度方面H.pylori cagA、vacA基因陽性和陰性有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01.）。⑥相關(guān)性分析表明EBV感染與cagA呈正相關(guān)（P=0.0064，r=0.28707），與vacA無相關(guān)性（P=0.1822，r=0.14270），⑦EBV對體外培養(yǎng)的胃上皮細(xì)胞SGC—7901細(xì)胞株的增值有明顯促進(jìn)作用，同時(shí)對細(xì)胞凋亡有抑制作用，且兩者均具有濃度依賴性。 結(jié)論：①EBV感染與胃癌的發(fā)生

7、發(fā)展有一定相關(guān)性，EBVaGC好發(fā)于男性，EBV感染與慢性萎縮胃炎→胃潰瘍→腸化生→胃癌演變過程呈正相關(guān)。但EBV感染與胃癌病人年齡、腫瘤分化程度無明顯相關(guān)性。②H.pylori cagA基因和vacA基因陽性菌株感染與胃癌的發(fā)生密切相關(guān)，且與胃癌的分化程度相關(guān)，但與胃癌病人性別、年齡無明顯相關(guān)性。③胃癌發(fā)生中EBV感染和H.pylori cagA基因型感染呈正相關(guān)，與vacA基因型感染無明顯相關(guān)性。④EBV對體外培養(yǎng)的胃上皮細(xì)胞的增值