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1、目的:研究西羅莫司(SRL)對氯化鈷(CoCl2)誘導(dǎo)的體外培養(yǎng)肝癌細(xì)胞HepG2中缺氧誘導(dǎo)因子一1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表達的影響。 方法:用CoCl2誘導(dǎo)細(xì)胞模擬缺氧微環(huán)境,并根據(jù)CoCl2濃度不同分為Oμnol/L,50μmol/L,100μmol/L,200μmol/L,
2、400μmol/L組;選擇CoCl2濃度為200μmol/L來模擬腫瘤內(nèi)缺氧微環(huán)境,同時聯(lián)合Onmol/L,10nmol/L,20nmol/L,30nmol/L,40nmol/L的西羅莫司作用于細(xì)胞24h。應(yīng)用免疫組織化學(xué)法及逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測HIF-1α、VEGF蛋白及mRNA的表達,并分析西羅莫司對其的作用。 結(jié)果:①隨著CoCl2濃度的提高,HIF-1α、VEGF蛋白及mRNA的表達升高(P<0.05
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