TRP通道調(diào)節(jié)膽囊平滑肌收縮作用與其小分子調(diào)節(jié)劑篩選研究.pdf

1、目的：
　　瞬時(shí)感受器電位C離子通道（Transient Receptor Potential Canonical,TRPC channels）是一類(lèi)可調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣濃度的非特異性陽(yáng)離子通道，在體內(nèi)分布廣泛，參與多種不同生理功能，包括對(duì)神經(jīng)、心血管、消化、呼吸、內(nèi)分泌和泌尿系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。目前，針對(duì)TRPC特異性的小分子化合物較少，且特異性差。本研究中，旨在發(fā)現(xiàn)特異性好的TRPC4通道小分子調(diào)節(jié)劑，這對(duì)于研究TRPC4通道的生理功能，調(diào)

2、節(jié)機(jī)理，以及臨床應(yīng)用都將起到很大的促進(jìn)作用。
　　方法：
　　1．化學(xué)合成：基于先導(dǎo)化合物ML401的母核結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)并化學(xué)合成了一系列1-H-苯并咪唑-2-胺類(lèi)衍生物。
　　2．PCR及突變制備TRPC4的突變體。
　　3．鈣成像檢測(cè)：在細(xì)胞水平對(duì)這些化合物進(jìn)行高通量篩選。
　　4．膜片鉗記錄：某些對(duì)TRPC4具有較好的抑制活性的化合物以全細(xì)胞記錄的方式進(jìn)行進(jìn)一步鑒別。
　　結(jié)果：
　　1．設(shè)計(jì)

3、合成了30個(gè)1-H-苯并咪唑-2-胺類(lèi)化合物。
　　2．制備出TRPC4的突變體（TRPC4 G503L）。
　　3．化合物21活性（IC50=0.65μM）顯著優(yōu)于陽(yáng)性化合物ML401（IC50=1.05μM）。
　　4．化合物G1224對(duì)配體激活TRPC4通道有明顯的增強(qiáng)作用（EC50=0.78μM）。
　　結(jié)論：
　　發(fā)現(xiàn)一系列對(duì)TRPC4有良好抑制效應(yīng)的化合物，尤其是化合物G1224對(duì)配體激活TRP