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1、實驗7 胃腸運動的直接觀察 離體腸段平滑肌的描記,目的:動物在體胃腸運動及調(diào)節(jié)了解腸段平滑肌的生理特性學習離體腸段平滑肌的實驗方法,原 理,胃腸道平滑肌經(jīng)常維持一定的緊張性收縮,在體內(nèi)受到神經(jīng)和體液的調(diào)節(jié)。在神經(jīng)及某些藥物的作用下,這種緊張性及運動節(jié)律可發(fā)生改變。神經(jīng)調(diào)節(jié)中,副交感神經(jīng)通過釋放乙酰膽堿使其運動加強,交感神經(jīng)通過釋放去甲腎上腺素使其運動減弱。,,原 理,2. 胃腸道平滑肌以膽堿能神經(jīng)占優(yōu)勢
2、,小劑量或低濃度的乙酰膽堿能激動M受體,產(chǎn)生與興奮膽堿能神經(jīng)節(jié)后纖維相似的作用,興奮胃腸道。阿托品與膽堿受體結(jié)合阻斷膽堿能遞質(zhì)從而產(chǎn)生抗膽堿作用。新斯的明作為膽堿酯酶的抑制劑,抑制乙酰膽堿的分解,使乙酰膽堿的作用持續(xù)加強。,原 理,3. 消化道平滑肌的特點是興奮性較低,收縮緩慢,富有伸展性,具有緊張性,自動節(jié)律性,對化學物質(zhì),溫度和機械牽張刺激較敏感等特點,給予離體腸肌一接近于在體情況的適宜環(huán)境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。本
3、實驗觀察當模擬內(nèi)環(huán)境發(fā)生變化時,離體小腸平滑肌運動的變化。,,,原 理,4.該實驗方法不僅在理論上證明平滑肌的生理特性,而且還可用來測量化學物質(zhì)或藥物的生理學特性,被稱為生物學鑒定法。,儀器設(shè)備,家兔,手術(shù)臺,手術(shù)器械,恒溫水浴槽,恒溫水浴,RM6240,張力換能器,氧氣袋,鐵架臺,燒杯,滴管,注射器,臺氏液,阿托品(0.5mg/ml),新思的明(1mg/ml) 0.01%腎上腺素,0.01%乙酰膽堿,1mol/LNaOH,1mol/
4、LHCl,2%戊巴比妥鈉。,,方法與步驟,一.胃腸運動觀察:1.手術(shù)操作:(1)家兔稱重,用戊巴比妥鈉麻醉(20毫克/公斤體重)。(2)將兔子仰臥位固定于手術(shù)臺上。 (3)剪腹部毛,沿腹中線切口,剖開腹腔,露出胃和腸。,方法與步驟,2.實驗項目:(1)觀察正常情況下胃和小腸的運動。注意其緊張度(可用手觸摸胃測其緊張度)。(2)由耳緣靜脈靜脈注射新思的明0.2-0.3ml,或滴幾滴于胃腸漿膜上,觀察胃和小腸運動的變化。(3)
5、在新思的明作用的基礎(chǔ)上,注射阿托品0.5ml,觀察胃和小腸運動的變化。,方法與步驟,二.離體小腸平滑肌的生理特性:1.實驗準備:裝備麥氏浴槽,將其放置于37℃恒溫水浴。麥氏浴槽內(nèi)盛滿37℃臺氏液,將充滿氧氣的球膽經(jīng)橡皮管連接至麥氏浴槽乙型通氣管上,不斷注入氧氣,調(diào)節(jié)氣流速度,使氣泡一個接一個注入。,,方法與步驟,2. 在幽門下端分離十二指腸3-4cm,雙結(jié)扎此腸段,于雙結(jié)扎中間將腸段剪斷,用臺氏液反復沖洗腸內(nèi)容物,在其兩端穿線,將一端
6、固定于麥氏浴槽乙型通氣管掛鉤上,另一端與張力換能器相連。,方法與步驟,3.待此裝置穩(wěn)定10-20分鐘后,使用RM6240記錄小腸段平滑肌運動曲線。,,4.實驗項目:(1)觀察記錄37 ℃臺氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。(2)觀察記錄25 ℃臺氏液中的腸段節(jié)律性收縮曲線。,(3)待臺氏液溫度穩(wěn)定在37 ℃后,用滴管向浴槽中加入0.01%乙酰膽堿3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動的變化。然后用臺氏液反復沖洗并更換新的臺氏液。(4)待平滑
7、肌穩(wěn)定后,加入0.01%腎上腺素3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動的變化。然后用臺氏液反復沖洗并更換新的臺氏液。,方法與步驟,(5)滴加1mol/L HCl溶液3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動的變化。然后用臺氏液反復沖洗并更換新的臺氏液。(6)滴加1mol/L NaOH溶液3-4滴,觀察并記錄小腸平滑肌活動的變化。然后用臺氏液反復沖洗并更換新的臺氏液。,注意事項,1. 實驗操作過程中,注意動物保溫。經(jīng)常 用溫熱的生理鹽水濕潤胃腸
8、。2. 取小腸標本時勿牽拉。3. 保證氧氣的補充 。,實驗要求,描述各項實驗項目所得實驗現(xiàn)象并分析。描記小腸平滑肌運動曲線,并分析各種因素對其影響的機制。,表1 不同處理因素對小腸平滑肌活動的影響(次/min,g),,乙酰膽堿作用于腸道平滑肌M3受體腎上腺素主要作用于腸道平滑肌β2受體,此受體為抑制性受體,抑制胃腸道運動。PH過高、過低,收縮幅度及張力都會降低,最適PH時收縮效果最好。腸管平滑肌對溫度改變極為敏感,當溫度降到
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