蟾皮中抗腫瘤小分子化合物的獲取和抗腫瘤作用機(jī)制的研究.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文蟾皮中抗腫瘤小分子化合物的獲取和抗腫瘤作用機(jī)制的研究姓名：何國平申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：王紅陽20090501第二軍醫(yī)大學(xué)2006級碩士學(xué)位論文細(xì)胞信號(hào)通路的調(diào)控作用，明確其抗腫瘤作用機(jī)理，為進(jìn)一步開發(fā)天然抗腫瘤藥物提供科學(xué)的理論依據(jù)及特異、有效的小分子藥性化合物／先導(dǎo)化合物。實(shí)驗(yàn)方法：1利用工業(yè)色譜、高效液相色譜和純化工廠技術(shù)平臺(tái)對蟾皮的組分進(jìn)行層層深入的分離純化；2采用CCK8法

2、對分離出的各級組分進(jìn)行抗腫瘤活性鑒定；3應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析蟾皮活性組分對腫瘤細(xì)胞周期的影響；4利用WesternBlot和RTPCR等分子生物學(xué)技術(shù)，初步探討蟾皮活性組分調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞中目的基因表達(dá)的情況；5建立活體成像荷瘤小鼠模型，長期監(jiān)測藥效組分體內(nèi)治療效果。結(jié)果：1在蟾皮的4種工業(yè)色譜粗提組分中，Ⅳ號(hào)具有抗腫瘤活性；該組分在10叫mg／ml水平就表現(xiàn)出抑制腫瘤細(xì)胞增殖的效應(yīng)，且隨著濃度的升高而增強(qiáng)；2在Ⅳ號(hào)粗提組分進(jìn)一步分離出的11

3、種初篩組分中，第11號(hào)(HCS411)具有抗腫瘤活性，且活性強(qiáng)于IV號(hào)組分；3肝癌、肺癌、白血病和前列腺癌細(xì)胞對HCS41l最敏感，乳腺癌、骨肉瘤和食管癌細(xì)胞較敏感，宮頸癌和結(jié)腸癌細(xì)胞不敏感；4與正常肝細(xì)胞相比較，HCS41l對肝癌細(xì)胞呈現(xiàn)一定的特異性；5HCS411的抑制腫瘤細(xì)胞增殖活性較目前I臨床抗腫瘤常用的華蟾素注射液及順鉑均強(qiáng)；6HCS411可以通過誘導(dǎo)G2／M期阻滯抑制腫瘤細(xì)胞增殖；7HCS411抗腫瘤活性不依賴P53：8HC