保存方法對(duì)同種異體軟骨移植物免疫原性的影響.pdf

1、目的: 比較慢速梯度降溫法、Co60射線照射+梯度降溫法及玻璃化法等保存方法對(duì)同種異體骨軟骨移植物免疫原性的影響，以此選擇一種最佳保存方法，為提高同種異體骨軟骨移植手術(shù)成功率奠定基礎(chǔ)。 方法: 將獲得的新鮮異體骨軟塊隨機(jī)分為4組，即A組：對(duì)照組（不采取任何措施）；B組：慢速梯度降溫組；C組：玻璃化組；D組：Co60射線照射+梯度降溫組。每組骨軟骨塊標(biāo)本160個(gè)，分為兩部分。一部分直接保存，保存8d、15d、30d

2、、60d時(shí)各取出標(biāo)本10枚，將軟骨細(xì)胞分離培養(yǎng)，制成細(xì)胞懸液；另一部分用同樣方法保存，制成細(xì)胞懸液后同IFN-γ混合，誘導(dǎo)出MHC-Ⅱ。以上兩部分標(biāo)本的細(xì)胞懸液分別用二抗法標(biāo)記細(xì)胞表面的MHC-Ⅰ，MHC-Ⅱ，利用流式細(xì)胞儀技術(shù)測(cè)定其保存后的抗原表達(dá)率。 結(jié)果: 1．經(jīng)過(guò)保存后，B，C，D組軟骨細(xì)胞表面的MHC-Ⅰ類(lèi)抗原表達(dá)率有大幅度下降，但各組間沒(méi)有顯著性差異（P>0．05），與A組有明顯顯著性差異（P<0．05）。

3、 2．經(jīng)過(guò)IFN-γ誘導(dǎo)后，各組標(biāo)本軟骨細(xì)胞表面可以表達(dá)MHC-Ⅱ類(lèi)抗原，B，C，D組軟骨細(xì)胞表面的MHC-Ⅱ類(lèi)抗原表達(dá)率有大幅度下降，但各組間沒(méi)有顯著性差異（P>0．05），與A組有明顯顯著性差異（P<0．05）。 3．經(jīng)過(guò)保存后，B，C，D組MHC-Ⅰ類(lèi)抗原和MHC-2類(lèi)抗原表達(dá)率均隨著時(shí)間的推移下降，但各組均在30天和60天的抗原表達(dá)率沒(méi)有顯著性差異（P>0．05）。 結(jié)論: 1．經(jīng)過(guò)各種方法保存后，