液氮保存山羊胎仔同種異體血管移植后的免疫學(xué)研究.pdf

1、目的:近年來新生兒嬰幼兒心臟外科的飛速發(fā)展對(duì)尋找合適的血管和瓣膜替代物提出了迫切要求。本實(shí)驗(yàn)旨在通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，為建立大月齡胎兒血管和瓣膜組織庫提供動(dòng)物學(xué)研究的理論基礎(chǔ)。 方法:取懷孕山羊(胎齡3～4月)10只，月齡在2～3月的幼羊17只。無菌條件下取出胎羊，并將胎羊主動(dòng)脈取出、修剪，熱缺血時(shí)間均在半小時(shí)之內(nèi)。共取得胎羊主動(dòng)脈20根。分為三組：一組為新鮮組(8根)，取出的主動(dòng)脈直接植入幼羊外周動(dòng)脈(股動(dòng)脈)；一組為冷凍組(8根)，

2、取出的主動(dòng)脈依次用冷凍保護(hù)液1號(hào)液和冷凍保護(hù)液2號(hào)液浸泡，后放置于4℃冰箱冷平衡，特制無菌冷凍袋包裝，用液氮蒸氣梯度降溫方法完成降溫，-196℃保存1個(gè)月后，迅速溫水復(fù)溫后植入幼羊外周動(dòng)脈(股動(dòng)脈)；對(duì)照組為未移植組；分別在1個(gè)月、4個(gè)月取出移植的血管，利用免疫組織化學(xué)的方法測(cè)定血管組織中的IgG，初步評(píng)估新鮮組和冷凍組移植前后的免疫學(xué)變化。 結(jié)果:17只幼羊進(jìn)行了血管移植，其中存活16只，存活率94％。分別對(duì)新鮮組和冷凍組移植

3、血管進(jìn)行免疫組化檢測(cè)，顯示IgG主要沉積于血管中膜，為胞漿染色。其中兩組移植1個(gè)月后、4個(gè)月后的結(jié)果與對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。移植1個(gè)月后兩組之間相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而移植4個(gè)月之后相比則沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。新鮮組移植1個(gè)月與4個(gè)月相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，冷凍組移植1個(gè)月與4個(gè)月相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論:由于山羊胎仔主動(dòng)脈及幼羊股動(dòng)脈較粗，因此，以山羊進(jìn)行同種異體血管移植的成活率較高。經(jīng)冷凍后的血管仍然保持著免疫原性，但低于未經(jīng)冷凍處理