熱應(yīng)激對(duì)牛體細(xì)胞克隆胚胎早期發(fā)育的影響.pdf

1、選取西安本地屠宰場(chǎng)牛卵母細(xì)胞，通過(guò)對(duì)成熟前卵母細(xì)胞進(jìn)行不同溫度熱應(yīng)激處理(對(duì)照組38.5℃，組2 39.5℃，組3 40.5℃，組4，41.5℃，組5 42.5℃)，比較重構(gòu)胚的卵裂率，囊胚率，并對(duì)不同供體細(xì)胞形成的克隆胚囊胚細(xì)胞數(shù)目進(jìn)行比較，研究短時(shí)間(30min)熱應(yīng)激對(duì)核移植后重構(gòu)胚發(fā)育的影響。對(duì)未采取熱應(yīng)激措施卵母細(xì)胞形成的克隆胚分別在單細(xì)胞階段和桑椹胚階段：(1)以溫度高低為標(biāo)準(zhǔn)(分組同上試驗(yàn))進(jìn)行30 min熱應(yīng)激處理，統(tǒng)計(jì)

2、囊胚發(fā)育率；(2)以高于對(duì)照組溫度2℃的溫度熱處理30min，1h，2h，統(tǒng)計(jì)囊胚發(fā)育率。研究熱應(yīng)激強(qiáng)度對(duì)胚胎的損傷影響。 結(jié)果表明： 1.卵母細(xì)胞41.5℃下30min的熱應(yīng)激，與對(duì)照組相比，卵裂率以及囊胚率都有顯著提高(P<0.05)。但是42.5℃組，雖然卵裂率有所提高，囊胚率與對(duì)照組相比卻顯著降低(P<0.05)。 2.用三種不同供體細(xì)胞分別進(jìn)行核移植。發(fā)現(xiàn)熱應(yīng)激卵母細(xì)胞形成的克隆胚與未熱應(yīng)激的卵母細(xì)胞形

3、成的克隆胚相比，在囊胚細(xì)胞數(shù)上無(wú)顯著差異(P>0.05)。說(shuō)明熱應(yīng)激不會(huì)影響胚胎的質(zhì)量，并且這一結(jié)果與供體細(xì)胞的種類無(wú)關(guān)。 3.對(duì)單細(xì)胞克隆胚進(jìn)行30min熱應(yīng)激發(fā)現(xiàn)，隨著應(yīng)激溫度的升高，克隆胚胎的卵裂率與對(duì)照組相比沒有明顯負(fù)效應(yīng)(P>0.05)，而囊胚發(fā)育率確逐漸降低，相比對(duì)照組，從41.5℃組開始有顯著負(fù)效應(yīng)(P<0.05)。 4.對(duì)桑椹克隆胚進(jìn)行30min熱應(yīng)激發(fā)現(xiàn)，隨著應(yīng)激溫度升高，囊胚發(fā)育率呈下降趨勢(shì)，42.5