貝那普利對(duì)UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的:通過(guò)采用單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)復(fù)制腎間質(zhì)纖維化(Renalinterstitial fibrosis,RIF)大鼠模型,觀察貝那普利對(duì)腎間質(zhì)纖維化的影響及其血液流變學(xué)和腎組織Periostin表達(dá)的變化。
　　 方法:將36只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組和貝那普利組,每組12只。模型組和貝那普利組大鼠麻醉、固定,結(jié)扎左側(cè)輸尿管。假手術(shù)組僅游離左側(cè)輸尿管,余不做任何處理。同步干預(yù)14天后,腹主動(dòng)脈取血檢測(cè)血液流變學(xué)指標(biāo)

2、、Scr及BUN變化；取左腎,剖開,一部分置于4％甲醛固定液固定,另一部分凍存于-80℃冰箱。HE染色及Masson染色觀察腎間質(zhì)變化；免疫組化檢測(cè)腎組織Ⅰ型膠原蛋白(Collagen-Ⅰ)；ELISA方法檢測(cè)各組大鼠腎組織AngⅡ、TGF-β1、Periostin蛋白水平的變化；RT-PCR檢測(cè)各組大鼠腎組織TGF-β1 mRNA和Periostin mRNA表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果:(1)腎功能指標(biāo):與假手術(shù)組比較,模型組血

3、清肌酐和尿素氮含量顯著升高(P<0.05),貝那普利組與模型組比較,血清肌酐和尿素氮含量顯著降低(P<0.05)。(2)HE染色觀察:與假手術(shù)組比較,模型組腎小管明顯擴(kuò)張變寬,可見(jiàn)管型,腎間質(zhì)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),纖維化明顯。貝那普利組腎小管稍增寬,少量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、無(wú)明顯的纖維化改變。(3)Masson染色顯示假手術(shù)組大鼠腎臟膠原染色主要位于腎小球基底膜、Bowman囊、系膜區(qū)和腎小管間的毛細(xì)血管周圍。模型組大鼠腎間質(zhì)寬度增加,亮綠色膠原

4、沉積顯著,腎小管上皮細(xì)胞萎縮,管腔擴(kuò)張,彌漫的單核、淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)和成纖維細(xì)胞增生及膠原纖維化形成,纖維化程度明顯。貝那普利組較模型組,腎小管擴(kuò)張、間質(zhì)增寬程度及膠原在間質(zhì)沉積程度均顯著降低。(4)血流變學(xué)的變化:和假手術(shù)組對(duì)比,模型組的血流高、中、低切變率下的全血黏度(BV)、血漿黏度(PV)、紅細(xì)胞壓積(Hct)等指標(biāo)顯著升高(P<0.05),貝那普利組與模型組相比顯著降低(P<0.05)。(5)免疫組化檢測(cè)Ⅰ型膠原結(jié)果提示:模型組術(shù)

5、后2周腎小管間質(zhì)可見(jiàn)明顯棕黃色物質(zhì)表達(dá),與假手術(shù)組相比顯著升高(P<0.05),貝那普利組與模型組相比顯著降低(P<0.05)。(6)ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示模型組大鼠腎組織Periostin蛋白、TGF-β1蛋白、AngⅡ蛋白大量表達(dá),與假手術(shù)組相比均顯著升高,貝那普利組與模型組相比顯著降低,(P<0.05)。(7)RT-PCR結(jié)果表明,Periostin mRNA在模型組大鼠腎組織大量表達(dá),比假手術(shù)組增多85.37％(P<0.05),