堿性成纖維細胞生長因子治療下肢缺血劑量的實驗研究.pdf

1、目的：通過對30只兔下肢缺血模型的大體觀察、DSA計數(shù)側(cè)支血管數(shù)、微血管密度檢測及微血管/肌纖維束比值測定，評價不同劑量rh-bFGF治療兔后肢缺血的有效性，篩選rh-bFGF治療兔下肢缺血的最佳劑量；通過肝、腎功能檢測、動脈造影和病理學觀察，評價不同劑量rh-bFGF治療兔后肢缺血的安全性；為臨床應(yīng)用rh-bFGF治療肢體動脈狹窄或閉塞性病變提供理論依據(jù)。 材料和方法：應(yīng)用30只大耳白兔，采用切除左側(cè)后肢股動脈及結(jié)扎其主要分支

2、的方法建立下肢缺血模型。隨機分為5組(每組6只)，A組(對照組)，經(jīng)肌肉局部注射5mlTris緩沖液/只；B、C、D、E組為治療組，B組，經(jīng)肌肉局部注射rh-bFGF2.5μg+5mlTris緩沖液/只；C組，經(jīng)肌肉局部注射rh-bFGF5μg+5mlTris緩沖液/只；D組，經(jīng)肌肉局部注射rh-bFGF10μg+5mlTris緩沖液/只；E組，經(jīng)肌肉局部注射rh-bFGF20μg+5mlTris緩沖液/只。各組在模型制作后第10天在術(shù)

3、側(cè)肢體股內(nèi)側(cè)肌群分5點注射給藥，造模術(shù)后觀察30天處死。各組于給藥前、給藥后10天、給藥后20天抽取靜脈血檢測肝、腎功能：各組動物處死前均采用DSA技術(shù)觀察肢體側(cè)支血管形成，計數(shù)側(cè)支血管數(shù)；處死動物后取股內(nèi)側(cè)肌肉制作標本，進行毛細血管密度、微血管/肌纖維束比值檢測及病理學觀察。 結(jié)果：1.大體觀察：各組動物實驗中均無死亡。模型制作后10天內(nèi)動物左下肢有不同程度的跛行。模型制作10天以后A、B組跛行逐漸加重：C、D、E組用藥后跛行

4、逐漸緩解。各組手術(shù)創(chuàng)口愈合較好，無下肢潰瘍壞疽。A組處死后取病理組織時發(fā)現(xiàn)一只愈合切口內(nèi)有膿腫形成。2.下肢動脈造影：DSA影像顯示各組左側(cè)股動脈連續(xù)性中斷，A組有少量纖細的側(cè)支血管分布于大腿中段乏血管區(qū)，B、C組由同側(cè)髂內(nèi)動脈、股深動脈發(fā)出數(shù)支側(cè)支血管，遠端動脈未見顯影，D、E組見缺血肢體有較多的側(cè)支血管迂曲走行，缺血肢體遠端動脈通過側(cè)支循環(huán)顯影，充盈速度較健側(cè)稍慢；各組DSA均未見腫瘤樣及畸形血管形成。D、E組側(cè)支血管數(shù)均多于對照組

5、及B、C組(P<0.05)，但D、E組間側(cè)支血管數(shù)比值無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；B、C組與對照組及B、C組間側(cè)支血管數(shù)比較均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。3.微血管密度和微血管/肌纖維束比值：B、C組與對照組微血管密度和微血管/肌纖維束比值差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；B、C組間微血管密度和微血管/肌纖維束比值無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；D、E組微血管密度和微血管/肌纖維束比值較對照組增高(P<0.05)；D、E組缺血肢體的微

6、血管密度和微血管/肌纖維束比值與B、C組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；但D、E組間微血管密度和微血管/肌纖維束比值無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。4.病理學觀察：A組骨骼肌纖維萎縮、變性，肌纖維間距增大，間質(zhì)內(nèi)血管稀少；B、C組骨骼肌纖維輕度萎縮，肌纖維間距增大，間質(zhì)內(nèi)見少量毛細血管；D、E組血管生成較多，管腔內(nèi)可見紅細胞，肌纖維未見明顯萎縮；各組骨骼肌細胞在rh-bFGF。的影響下未見異常增殖或腫瘤樣生長等表現(xiàn)。5.血肝、腎功能

7、檢測：各組給藥前、給藥后10天、給藥后20天抽取靜脈血檢測血ALT、AST、BUN、Cr，各組內(nèi)不同時間各項指標檢測值比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結(jié)論：1.rh-bFGF可有效促進兔缺血肢體血管新生、側(cè)支循環(huán)建立；其療效隨著rh-bFGF劑量的增加而增強，在10μg時取得最好的治療效果，20μg時療效不再增加，10μg是rh-bFGF治療肢體缺血的最佳劑量。2.應(yīng)用實驗劑量rh-bFGF治療肢體缺血是安全的，對肝、腎