人CD4胞外區(qū)及人和小鼠MHCⅡ分子胞外區(qū)的表達及活性鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、CD4分子在機體免疫系統(tǒng)中起重要作用,它與MHCⅡ、TCR相互作用,形成CD4-MHCⅡ-TCR復(fù)合物,介導(dǎo)特異性抗原呈遞以及激活CD4+T細胞,引發(fā)機體特異性的免疫應(yīng)答。同時,CD4是HIV感染的宿主細胞上主要受體,CD4融合蛋白的藥物及CD4的抗體在艾滋病的臨床研究中顯示了良好的治療效果。
   本研究嘗試通過真核及原核表達系統(tǒng)對人CD4蛋白胞外段進行表達。真核表達中,應(yīng)用CHO細胞和293FT細胞分別表達CD4蛋白胞外段,

2、僅含有信號肽的序列有小量表達。原核表達中,應(yīng)用大腸桿菌BL21菌表達的人CD4胞外段不同域以包涵體的形式存在,經(jīng)尿素變性及復(fù)性,再經(jīng)分子篩純化之后,其純度能夠達到90%以上。經(jīng)HIV-1NL4-3細胞中和實驗,表明CD4(d1),CD4(d1-2),CD4(d1-4)有阻斷HIV-1NL4-3病毒感染TZM-b1細胞的能力,因此表達的蛋白是有活性的。因此通過大腸桿菌這一原核表達系統(tǒng)表達的人CD4蛋白胞外段不同域,可用于進一步分析CD4抗

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