三黃雞CD4胞外區(qū)基因的克隆表達(dá)及其多抗的制備.pdf_第1頁(yè)
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1、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文三黃雞CD4胞外區(qū)基因的克隆表達(dá)及其多抗的制備姓名：王成玉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：張冰夏春20070601AbstractCD4isasinglechain仃ansmembraneglycoprotemmairdy傭Tcell皇whichplayacentralroleinlymphocytedifferentiationandcellmediatedimmunityApairofprimer

2、WUdesigneda∞)rdmstOthepublishedchickenCD4genesequencesandthegenefragmentoflhechickenCD4a血a∞lluI盯托g(shù)ionw笛donedfromcDNAlibrarybyusingitTheDNAfiagmentwasthensuccessfullyclonedintopGEMTEasyvectorwhichwasconfnmedbysequenceanal

3、ysisandres城ctenzymeidentificationThentheDNAfragmentandtheplasmidpMALp2Xwe∞ligatedtOconstructtherecombinantexpressionplasmid，andtherecombinantengineeringbacteriawe∞identifiedbysequenceanalysisandrestrictenzymeidentificati

4、onAf嘲wardstherecombinant目嚼刪：eringbacteriaWClq，inducedtoexpressforeignproteinwhichwaspurifiedwithamyloseaffinityresincolunmPurifiedrecombinantproteinnamedMBPchCD4，wasanalyzedbySDSPAGEInordertogetantibody，theBALB／cmicewere

5、immunizedwiththeproteinMBPchCD4accordingtotheroutinemethodandthencollectedtheserunLThefiterofthemiceantiMBPchCD4antibodywasmeasuredbyELISAassayTheresultsshowedthatchickenCD4genewsssuccessfullyclonedfromcDNAlibrarywhichwa

6、s1206bpinl即g札EcofiTBIstrainswithpMALp2X／chCD4successfullyexpressedtherecombinantproteinbearing∞NterminalMaltcr5eBindingProteintagwithmolecularweightof875KDa，whichwasconsistentwiththepredictedputativemolecularweightsofMBP

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