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文檔簡介
1、目的:有研究表明幽門螺桿菌感染相關(guān)性胃癌起源于骨髓源性細胞—骨髓基質(zhì)干細胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)。MSCs具有高度自我更新和多向分化的雙重特性。正常環(huán)境中,MSCs很好地保持著靜息和自身增殖分化的平衡。后者的失衡是否和H.Pylori相關(guān)的胃癌有關(guān)系未見報道。我們通過體外實驗了解H.Pylori對MSCs增殖的影響,來初步探索MSCs參與H.Pylori慢性感染致胃癌發(fā)生發(fā)展的
2、可能機制。
方法:(1)培養(yǎng)純化BALB/C小鼠原代MSCs并鑒定;(2)液體培養(yǎng)H.Pylori (TN2菌株);(3)H.Pylori培養(yǎng)上清液、超聲粉碎菌體及正常H.Pylori液體培養(yǎng)基與MSCs共培養(yǎng);(4)MTT法初步檢測不同濃度(MOI=H.Pylori:MSCs=5:1、50:1、100:1)及不同時間點(6 h、12 h、24 h)H.Pylori對MSCs增殖的影響。并確定兩者作用的最佳時間;(5)流式
3、細胞術(shù)(CFSE法)進一步檢測不同濃度及時間點H.Pylori對MSCs增殖的影響。
結(jié)果:(1)成功分離BALB/C小鼠原代MSCs,其第六代細胞的純度可達到95%以上。(2)H.Pylori液體培養(yǎng)48小時后可達到4×108 CFU/ml。(3)MTT法結(jié)果表明共培養(yǎng)體系中H.Pylori上清液及超聲粉碎菌體各濃度在6 h和12 h促進MSCs增殖(P<0.05),尤其上清液及超聲粉碎菌體6 h最為顯著。(4)流式細胞
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