甲基硫氧嘧啶對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖與凋亡的影響.pdf

1、目的:
　　本實驗旨在通過體外分離、培養(yǎng)及鑒定大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞，研究甲基硫氧嘧啶對骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖與凋亡的影響，為進(jìn)一步探討它對骨髓造血微環(huán)境的影響及作用機(jī)理提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　1.體外分離、培養(yǎng)及鑒定SD大鼠的骨髓基質(zhì)細(xì)胞，取對數(shù)生長期的細(xì)胞用于實驗研究。
　　2.應(yīng)用CCK-8法觀察甲基硫氧嘧啶對骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖的影響。
　　3.流式細(xì)胞術(shù)檢測甲基硫氧嘧啶對骨髓基質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響。
　

2、　結(jié)果:
　　1.通過全骨髓貼壁法得到貼壁生長，形態(tài)均一的單層細(xì)胞;流式細(xì)胞術(shù)檢測顯示CD90表達(dá)陽性、CD34與CD45表達(dá)陰性，鑒定成功。
　　2.CCK-8法檢測結(jié)果顯示:隨著甲基硫氧嘧啶濃度增加與作用時間延長，增殖抑制作用逐漸增強(qiáng)。同一時間，從40mmol/L起，隨著濃度增加，實驗組與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。同一濃度，隨著作用時間延長，不同時間組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);與12h

3、組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。作用48小時，對細(xì)胞增殖的抑制作用最強(qiáng)。
　　3.流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示:從40mmol/L起，隨著藥物濃度的增加，細(xì)胞的凋亡率逐漸增加，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);不同組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.全骨髓貼壁法成功獲得SD大鼠BMSCs。
　　2.甲基硫氧嘧啶具有抑制骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖和促進(jìn)其凋亡的作用。