虎杖對(duì)博萊霉素致肺纖維化大鼠肺成纖維細(xì)胞MMP-2-TIMP-1mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的:建立博萊霉素誘導(dǎo)肺纖維化大鼠模型，針對(duì)肺纖維化的病理發(fā)生過程，分為造模后第3、7、14、28、42天六個(gè)時(shí)間點(diǎn)，動(dòng)態(tài)觀察虎杖對(duì)肺纖維化過程中肺成纖維細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase2，MMP-2)和組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑1（tissue inhibitor of metalloproteinase1，TIMP-1）基因表達(dá)的影響，從而探討其作用機(jī)制。
　　方法:
　?、龠x取雄性S

2、D大鼠145只，清潔級(jí)，體重200±10g，隨機(jī)分成7組：正常對(duì)照組、模型組、陽性對(duì)照組、虎杖預(yù)防組各25只、3天治療組、7天治療組、14天治療組分別為20只、15只、10只。
　?、诮?jīng)氣管內(nèi)一次性注入博萊霉素制作大鼠肺纖維化模型，正常對(duì)照組則以生理鹽水代替博萊霉素來完成。
　?、坳栃詫?duì)照組造模當(dāng)天予0.5％地塞米松4ml/kg/天灌胃直至處死；虎杖預(yù)防組、3天治療組、7天治療組、14天治療組分別在造模前2天、造模后第3天、

3、造模后第7天和造模后第14天開始胃飼受試藥物4ml/kg/天（含生藥量1g/ml）。
　?、茉炷：蟮?、7、14、28、42天分別處死5只大鼠取肺組織。
　　⑤左肺在充分灌洗后采用胰酶消化法行肺成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。
　?、抻曳谓M織hemotoxylin-eosin（HE）染色、Masson三色染色；肺成纖維細(xì)胞行逆轉(zhuǎn)錄－聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法檢測其中MMP-2、TIMP-1mRNA的表達(dá)。
　?、卟捎肧PS

4、S11.5統(tǒng)計(jì)軟件分析處理數(shù)據(jù)。
　　結(jié)果:地塞米松陽性對(duì)照組、虎杖預(yù)防組及3、7、14天治療組，除第42天肺纖維化大鼠肺成纖維細(xì)胞MMP-2mRNA表達(dá)與模型組MMP-2mRNA表達(dá)相似，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余之前的時(shí)間點(diǎn)均較模型組減弱（P<0.05或P<0.01）；TIMP-1mRNA表達(dá)均較模型組減弱（P<0.05或P<0.01），其持續(xù)抑制表達(dá)的時(shí)間更長，直至第42天。
　　結(jié)論:
　　第一，虎杖抑制TIMP-1在