糖尿病高血糖通過氧化損傷加重局灶性腦缺血再關注損傷.pdf

1、目的:高血糖能夠加重腦缺血再灌注損傷，但具體的途徑和分子機制尚不清楚，本研究以高血糖局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠作為模型，探討高血糖加重腦缺血再灌注損傷中神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細胞氧化損傷的作用。
　　方法:將雄性SD大鼠隨機化分為正常血糖腦缺血再灌注組（簡稱正常血糖組）、糖尿病高血糖腦缺血再灌注組（簡稱糖尿病組）以及假手術對照組（簡稱假手術組），采用鏈脲佐菌素（Streptozotocin,STZ,55mg/kg）制備Ⅰ型糖尿病大鼠模型

2、，糖尿病高血糖形成后3d內(nèi)實施 MCAO缺血30min，再灌注1d，3d，7d，14d。分別進行組織學、8羥基脫氧鳥苷（8-hydroxy-2’deoxyguanosine，8-OHdG）免疫組織化學、NeuN和8-OHdG免疫熒光雙標記及GFAP和8-OHdG免疫熒光雙標記技術，對比觀察各組神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細胞的損傷及其與8-OHdG的關系。
　　結(jié)果:組織學顯示，正常血糖組再灌注1d腦組織出現(xiàn)水腫，糖尿病組較正常血糖組有所加重

3、，出現(xiàn)較多的固縮神經(jīng)元，再灌注3d腦組織水腫進一步加重，固縮神經(jīng)元進一步增多,可見多數(shù)細胞溶解壞死，存留泡沫樣結(jié)構，同樣，糖尿病組表現(xiàn)更為嚴重；再灌注7d正常血糖組神經(jīng)元固縮和腦水腫明顯減輕，糖尿病組仍可見少數(shù)神經(jīng)元固縮和腦水腫；再灌注14d正常血糖組神經(jīng)元固縮和腦水腫消失，膠質(zhì)細胞增加，糖尿病組可見輕度腦水腫。免疫組化顯示，再灌注3d，正常血糖組及糖尿病組8-OHdG陽性細胞數(shù)量均明顯增加，高血糖組8-OHdG陽性細胞數(shù)量明顯高于正常

4、血糖組（P<0.05），再灌注7d和14d8-OHdG免疫陽性細胞明顯減少，但仍多于假手術組（P<0.05）；免疫熒光雙標記提示，再灌注3d時，正常血糖組及糖尿病組8-OHdG陽性的神經(jīng)元均達高峰，且糖尿病組的8-OHdG陽性神經(jīng)元明顯高于正常血糖組（P<0.05），再灌注7d和14d時，8-OHdG陽性的神經(jīng)元有所減少；且正常血糖組再灌注3 d8-OHdG陽性的星形膠質(zhì)細胞開始增加，再灌注7 d時達高峰，糖尿病組較正常血糖組雙標陽性細

5、胞明顯增加（P<0.05），再灌注14d雙標陽性細胞數(shù)有所下降,但仍多于假手術組。
　　結(jié)論:（1）糖尿病高血糖可以加重腦缺血再灌注損傷，使局灶性腦缺血梗死區(qū)及其周圍腦組織水腫加重，梗死區(qū)擴大，神經(jīng)元變性和凋亡增加，恢復時間延長；（2）腦缺血再灌注引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)氧化損傷，局灶性腦缺血30min，再灌注1天氧化損傷明顯增加，再灌注3天時達到高峰，再灌注7天氧化損傷明顯減少；糖尿病高血糖能夠明顯加重再灌注1天和3天時的氧化損傷，再灌