低分子量殼聚糖的制備及其載藥納米粒的體內(nèi)藥效學(xué)研究.pdf

1、殼聚糖是一類由氨基葡萄糖組成的陽離子聚合物，具有良好的生物相容性和低毒性，殼聚糖及其衍生物具有保護(hù)并促進(jìn)生物大分子藥物吸收的作用。但是殼聚糖在體內(nèi)不易降解，長期使用易在體內(nèi)產(chǎn)生積聚，且存在一定程度的血液相容性及對細(xì)胞的毒性等問題。目前使用的殼聚糖，分子量大、粘度高，無法在生理?xiàng)l件下溶解，作為藥物載體的大分子量殼聚糖難以被人體吸收。因此，采用低分子量殼聚糖作為藥物載體材料具有重要意義。 本課題采用纖維素酶水解技術(shù)，以脫乙酰甲殼素為

2、原料，制備低分子量殼聚糖；采用超濾技術(shù)分離得到不同分子量的殼聚糖；以凝膠滲透色譜法測定殼聚糖分子量，由水解比色測定法測定殼聚糖的純度與含量。以胰島素為模型藥物，以低分子量殼聚糖作為納米粒載體材料，采用溶劑擴(kuò)散法制備納米粒，并篩選制備工藝條件。通過加入不同濃度脫吸附劑——十二烷基硫酸鈉(SDS)，測定藥物回收率，考察脫吸附劑的脫吸附效果，優(yōu)選脫吸附劑的種類與濃度。采用粒度及表面電位分析儀，測定殼聚糖納米粒的粒徑、表面電位(Zeta電位)并

3、對其理化性質(zhì)進(jìn)行考察。考察藥物的體外釋放和載藥納米粒經(jīng)呼吸道插入給藥的體內(nèi)藥效學(xué)。 通過控制酶水解時(shí)間，并采用截留分子量分別為50Kda和10Kda的中空纖維素膜進(jìn)行截流與濃縮，得到低分子量殼聚糖。經(jīng)凝膠滲透色譜法測定，其平均分子量為20Kda，純度為96.60±1.56﹪。采用酶解法制備低分子量殼聚糖反應(yīng)條件溫和、過程容易控制，用超濾方法可實(shí)現(xiàn)不同分子量水解產(chǎn)物的有效分離；采用凝膠滲透色譜法和水解比色法測定，可進(jìn)行水解殼聚糖質(zhì)

4、量的有效控制。經(jīng)溶劑擴(kuò)散法制備得到的殼聚糖納米粒，呈類圓形球體，粒徑分布較窄，且隨制備工藝中無水乙醇加入量的增加、分散用超聲次數(shù)的增多，而使粒徑變小。殼聚糖納米粒帶正電荷，Zeta電位值大于+30mV，Zeta電位較高，體系相對穩(wěn)定。高速離心過濾法測得的藥物平均包封率為92.65±2.78﹪(n=3)。藥物的體外釋放研究結(jié)果顯示，藥物以近似零級速率從納米粒中釋放，24h釋放了被包封藥物總量的37.19﹪，釋藥速率方程為v=0.8963x