MicroRNA-24及其靶基因GATA-2在腎缺血再灌注損傷的表達(dá)變化.pdf

1、目的：研究miR-24及靶基因GATA-2在腎臟缺血再灌注損傷中的動態(tài)表達(dá),探討miR-24在腎缺血再灌注損傷中的調(diào)控作用及其機(jī)制。
　　方法：建立大鼠RI/RI模型,分別于術(shù)前及腎臟血流再灌注后4h、24h、48h、72h采血及收集腎臟標(biāo)本,檢測腎功能,并且行HE染色觀察腎臟組織病理學(xué)改變,采用實(shí)時熒光定量PCR(Real-timePCR)方法檢測miR-24及其靶基因GATA-2在各組缺血受損腎臟中的mRNA表達(dá)水平。采用免疫

2、組織化學(xué)染色方法觀察GATA-2在各組缺血受損腎臟中的的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1、RI/RI模型成功:①:腎功能測定:假手術(shù)組(sham)大鼠腎功能變化與正常組(N)比較無差異(P>0.05),各I/R組中大鼠腎功能發(fā)生明顯改變,以I/R24h組中大鼠腎功能變化(Cr:234±50.52umol/L)最為顯著,各I/R與sham組及N組比較均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);②:HE染色:各I/R組大鼠腎臟呈不同程

3、度的病理改變,以I/R24h組中病理改變最嚴(yán)重,與Sham組及N組顯著區(qū)別。
　　2、Real-timePCR檢測顯示:miR-24在腎I/R損傷后4h、24h、48h及72h表達(dá)情況呈現(xiàn)出不同程度的上調(diào)趨勢,sham組miR-24表達(dá)上調(diào)倍數(shù)為1.31±0.49,與N組(1.11±0.27)相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),其I/R4h組、I/R24h組、I/R48h組及I/R72h組miR-24表達(dá)上調(diào)倍數(shù)分別為3.13±0.

4、88、1.76±0.17、3.13±0.97及6.27±0.83,其中以72h表達(dá)上調(diào)最為顯著,I/R4h組、I/R48h組與Sham組比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而I/R24h組、I/R72h組與Sham組比均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　3、Real-timePCR檢測顯示:GATA-2在腎I/R損傷后4h、24h、48h及72h表達(dá)情況呈現(xiàn)出不同程度的下調(diào)趨勢,其sham組GATA-2表達(dá)下調(diào)倍數(shù)為0.91±

5、0.18,與N組(0.97±0.20)相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),其I/R4h組、I/R24h組、I/R48h組及I/R72h組GATA-2表達(dá)下調(diào)倍數(shù)分別為0.54±0.10、0.65±0.13、0.30±0.08及0.21±0.11,其中以72h表達(dá)下調(diào)最為顯著,各I/R組與Sham組相比均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　4、免疫組化檢測顯示:腎I/R損傷后GATA-2主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞胞核內(nèi)(胞核呈黃褐色

6、),但腎小球內(nèi)皮細(xì)胞胞核也可見少量表達(dá)。其蛋白表達(dá)水平呈現(xiàn)下調(diào)趨勢,Sham組與N組相比,GATA-2的表達(dá)水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),各I/R組中GATA-2表達(dá)水平均低于N組及Sham組,其中以I/R72h組表達(dá)下降最為明顯,各I/R組與N組和sham組相比均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　1、大鼠腎臟缺血再灌注損傷過程中miR-24的表達(dá)顯著上調(diào),其靶基GATA-2表達(dá)水平顯著下調(diào);