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文檔簡(jiǎn)介
1、[目的]
通過建立大鼠肝缺血再灌注損傷模型,檢測(cè)缺血前、缺血后和缺血再灌注后的UCP2的表達(dá)。比較缺血前、缺血后和缺血再灌注后UCP2的表達(dá)差異,及其與肝臟ATP和MDA變化的關(guān)系。初步探討UCP2在肝缺血再灌注損傷中的作用。從分子生物學(xué)角度闡述肝缺血再灌注損傷機(jī)制,為肝缺血再灌注損傷的防治提供理論基礎(chǔ)。
[方法]
將健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(SO)、30min缺血組(30min I)、
2、30min缺血再灌注組(30min I/R)、60min缺血組(60min I)、60min缺血再灌注組(60minI/R),每組10只。參照Kohli的方法,用無損傷血管夾阻斷通往肝左中葉的血管、肝管蒂,造成肝實(shí)質(zhì)70%缺血,建立大鼠肝缺血再灌注損傷模型。造模成功后,取每只大鼠血液,離心取血清全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALT和AST;取缺血和缺血再灌注側(cè)的肝組織,部分甲醛固定,部分肝組織-70℃冰箱保存,分別用病理切片肝組織缺血和缺血再灌注
3、損傷后的情況,用酶標(biāo)儀檢測(cè)肝組織勻漿ATP和MDA的變化,RT-PCR檢測(cè)肝組織UCP2的表達(dá),并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
[結(jié)果]
1.病理結(jié)果:缺血組肝組織呈灰白色,病理切片可見散在的凋亡細(xì)胞(60min I組較30min I組多);缺血再灌注組呈暗紅色,30min I/R組病理切片可見點(diǎn)狀壞死,而60min I/R組可見橋接壞死。
2.肝功能結(jié)果:假手術(shù)組、缺血組和缺血再灌注組的血清ALT和AST
4、依次升高,兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3.肝組織ATP檢測(cè)結(jié)果:假手術(shù)組、缺血組和缺血再灌注組肝組織ATP依次降低,兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
4.肝組織MDA檢測(cè)結(jié)果:缺血組和缺血再灌注組肝組織MDA含量較假手術(shù)組高,但是缺血再灌注組較缺血組有所下降,兩兩比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
5.肝組織UCP2的表達(dá)情況:假手術(shù)組、缺血組和缺血再灌注組肝組織UCP2表達(dá)依
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