小鵝瘟病毒VP3基因疫苗在小鼠體內(nèi)動態(tài)分布與表達(dá)的研究.pdf

1、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文小鵝瘟病毒VP3基因疫苗在小鼠體內(nèi)動態(tài)分布與表達(dá)的研究姓名：劉曉東申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：汪銘書程安春20070601本論文的創(chuàng)新性研究工作1本論文在國內(nèi)外首次將GPVoVP3基因疫苗(pcDNAGPVVP3)免疫BALB／c小鼠，并系統(tǒng)檢測pcDNAGPVVP3及其表達(dá)產(chǎn)物在小鼠體內(nèi)的動態(tài)分布，為pcDNAGPVVP3的進(jìn)一步臨床應(yīng)用研究和闡明pcDNAGPVVP3的免疫發(fā)生機理提

2、供實驗數(shù)據(jù)。2在國內(nèi)外首次應(yīng)用目前最為有效的兩種免疫途徑(肌肉注射和基因槍轟擊)以不同的免疫劑量對BALB／c小鼠免疫pcDNAGPVVP3，研究不同免疫途徑和劑量對pcDNAGPVVP3及其表達(dá)產(chǎn)物在小鼠各組織和器官內(nèi)的分布與含量的影響，比較兩種免疫途徑的優(yōu)劣和篩選兩種途徑各自最佳的免疫劑量。3在國內(nèi)外首次建立了特異性檢測小鵝瘟病毒(GPV)VP3基因的熒光定量PCR(FQPCR)，該方法特異性強，靈敏度高(可以檢測到28個拷貝數(shù))、

3、重復(fù)性好(變異系數(shù)CV為O01)，核酸模板數(shù)與FQPCR測定的Ct值具有很好的直線相關(guān)性(相關(guān)系數(shù)達(dá)劍0999)。并首次應(yīng)用建立的FQPCR系統(tǒng)檢測pcDNAGPVVP3在小鼠組織和器官中的分布與精確含量，得到pcDNAGPVVP3在小鼠體內(nèi)較為確實的動態(tài)分布規(guī)律。4在國內(nèi)外首次通過免疫組織化學(xué)系統(tǒng)檢測pcDNAGPVVP3免疫小鼠后其表達(dá)產(chǎn)物在小鼠體內(nèi)的分布與含量。5在國內(nèi)外首次用FQPCR和免疫組織化學(xué)系統(tǒng)檢測GPV弱毒疫苗經(jīng)肌肉注