杏和李樹(shù)上發(fā)生的類(lèi)病毒種類(lèi)鑒定與序列分析.pdf

1、對(duì)采自北京、湖北、河北、山東、陜西、黑龍江、山西、吉林、甘肅、內(nèi)蒙古、廣西、新疆、福建13個(gè)不同省(市)的61個(gè)杏樣品、68個(gè)李樣品進(jìn)行類(lèi)病毒的檢測(cè)與序列分析。首先從以上樣品中提取低分子RNA，然后運(yùn)用斑點(diǎn)雜交、正反向聚丙烯酰胺凝膠電泳、生物學(xué)檢測(cè)、RT-PCR等方法進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明：杏有8個(gè)樣品帶有啤酒花矮化類(lèi)病毒(Hop stunt viroid，HSVd)，分別來(lái)自北京、河北、陜西、吉林4個(gè)省市，感染率為13.1％；李有15個(gè)樣

2、品帶有HSVd，分別來(lái)自北京、內(nèi)蒙古、河北、山西、吉林5個(gè)省市，感染率為22.1％。但是采集的所有杏和李的樣品均不帶有桃潛隱花葉類(lèi)病毒(Peach latent mosaic viroid，PLMVd)。本研究是HSVd在中國(guó)杏和李樹(shù)上的首次報(bào)道。 分別從檢測(cè)呈陽(yáng)性的8個(gè)杏樣品和15個(gè)李樣品中挑取3個(gè)杏樣品和4個(gè)李樣品進(jìn)行HSVd的克隆、測(cè)序分析，并與GenBank中己報(bào)道的HSVd序列進(jìn)行比較分析，結(jié)果表明： 1．從中

3、國(guó)杏和李樹(shù)上分離得到的HSVd序列變異較小，特別是中央保守區(qū)幾乎沒(méi)有變化，且序列變異與地域、寄主等無(wú)明顯相關(guān)性。 2．從HSVd的自然寄主李PB21‘黑寶石’中，首次發(fā)現(xiàn)了該類(lèi)病毒的分子內(nèi)自然重組現(xiàn)象，在堿基位置244與245之間插入了與堿基位置230-244的序列完全一樣的15個(gè)堿基)，命名為HSVdD-15。 3．本研究在GenBank中共登錄23條HSVd序列，其中來(lái)自杏的有7條(登錄號(hào)：DQ362901，DQ36