湖北省煙草病毒病毒原種類的鑒定.pdf

1、煙草病毒病是全世界煙草種植區(qū)的重要病害之一，嚴(yán)重影響煙草的產(chǎn)量和品質(zhì)。湖北是我國(guó)煙草種植大省，近年來(lái)，煙草病毒病的發(fā)生危害呈上升趨勢(shì)，為了弄清湖北煙草病毒病的種類，在本省十堰、襄陽(yáng)、恩施、宜昌主產(chǎn)區(qū)部分煙草品種病毒病的田間調(diào)查的基礎(chǔ)上，在室內(nèi)對(duì)采集的366份樣本進(jìn)行了毒原種類的鑒定。
　　 1.湖北省煙草病毒病類型主要為花葉型、畸形、閃電斑型、脈壞死型、蝕紋型和環(huán)斑型，以花葉型為主，等其他類型發(fā)生較少，并伴有2種或2種以上癥狀復(fù)

2、合的混合型癥狀；十堰、襄陽(yáng)以花葉型為主，恩施、宜昌以花葉型和畸形為主，且目前僅在襄陽(yáng)地區(qū)發(fā)現(xiàn)有環(huán)斑癥狀。
　　 2.指示植物法檢測(cè)結(jié)果顯示，接種的10種指示植物上的癥狀表現(xiàn)有花葉、明脈、畸形、局部枯斑、褪綠、蝕刻和環(huán)斑，且不同的病毒病癥狀類型在不同的指示植物上表現(xiàn)不同，初步推斷這些樣本含有煙草花葉病毒(Tobacco mosaic virus，TMV)、黃瓜花葉病毒(Cucumber mosaic virus，CMV)、馬鈴薯X

3、病毒(Potato X virus，PVX)、馬鈴薯Y病毒(Potato Y virus，PVY)、煙草蝕紋病毒(Tobacco etch virus，TEV)、煙草環(huán)斑病毒(Tobacco ringspot virus，TRSV)等6種病毒。
　　 3.血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，TMV、CMV、PVX、PVY、TEV、TRSV的檢出率分別為92.1%、42.1%、45.6%、35.0%、22.4%、12.6%，TMV檢出率最高，為優(yōu)

4、勢(shì)毒原，不同地區(qū)毒原分布和優(yōu)勢(shì)毒原種類略有差異；檢測(cè)出的復(fù)合侵染率達(dá)70.8%，共有29種復(fù)合侵染類型，以TMV+PVX檢出率最高，不同地區(qū)復(fù)合侵染率和優(yōu)勢(shì)復(fù)合侵染類型差異明顯。
　　 4.不同煙草品種病毒病侵染狀況不同?？緹煒颖綯MV、CMV、PVX、PVY、TEV、TRSV的檢出率分別為85.5%、47.1%、51.6%、24.0%、22.2%、19.9%，復(fù)合侵染率65.6%，共有25種復(fù)合類型，以TMV+CMV+PVX+

5、PVY+TEV+TRSV檢出率最高；白肋煙樣本TMV、CMV、PVX、PVY、TEV、TRSV的檢出率分別為93.2%、37.5%、36.4%、23.9%、21.6%、2.2%，復(fù)合侵染率65.9%，共有15種復(fù)合類型，以TMV+PVX檢出率最高；馬里蘭煙樣本TMV、CMV、PVX、PVY和TEV的檢出率分別為100%、29.8%、36.8%、94.7%、21.1%，復(fù)合侵染率98.2%，共有7種復(fù)合類型，以TMV+PVY檢出率最高。<

6、br>　　 5.分子生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，獲得了TMV313bp的目標(biāo)片段，TMV分離物間核酸同源性為98.4%～100%，與已注冊(cè)的TMV CP基因核酸同源性為96.81%～99.68%；獲得了CMV326bp的目標(biāo)片段，CMV分離物間核酸同源性為93.6%～100%，與已注冊(cè)的CMV CP基因核酸同源性為92.64%～97.55%；獲得了PVY825bp的目標(biāo)片段，PVY分離物間核酸同源性為98.9%～100%，與已注冊(cè)的PVY C