三羥異黃酮與RNA干擾survivin基因聯(lián)合應(yīng)用于DU-145前列腺癌細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、三羥異黃酮(genistein)是大豆異黃酮中一種重要的非營(yíng)養(yǎng)成分.大量的體內(nèi)和體外研究證實(shí)它可以抑制多種腫瘤如胃癌、乳癌、結(jié)腸癌等.RNA干擾(RNAinterference,RNAi)是一項(xiàng)能有效而特異地抑制基因表達(dá)的新技術(shù),已廣泛應(yīng)用于抗腫瘤的研究. 為了研究genistein與RNA干擾survivin聯(lián)合使用在抑制前列腺癌細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)凋亡中的作用,本文通過(guò)MTT、細(xì)胞計(jì)數(shù)法和熒光顯微鏡分別檢測(cè)genistein對(duì)DU

2、-145細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡的影響;構(gòu)建siRNA表達(dá)重組質(zhì)粒pU6+27-survivin,并轉(zhuǎn)染DU-145細(xì)胞,RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞中survivin基因的mRNA表達(dá);MTr法和流式細(xì)胞儀(Fluorescein Activated Cell Sorter,FACS)分別檢測(cè)genistein與RNA干擾survivin聯(lián)合使用對(duì)細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:隨著genistien濃度和/或作用時(shí)間增大,DU-

3、145和Hela細(xì)胞相對(duì)活力明顯下降.相同濃度的genistein對(duì)Hela細(xì)胞增殖的抑制率均高于其對(duì)DU-145細(xì)胞的抑制率.重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組DU-145細(xì)胞相對(duì)活力比genistein處理組DU-145細(xì)胞相對(duì)活力要低,genistein和重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染聯(lián)合處理的DU-145細(xì)胞相對(duì)活力最低.重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組較genistein組誘導(dǎo)DU-145細(xì)胞凋亡的效果好.重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染和genistein聯(lián)合使用組誘導(dǎo)DU-145細(xì)胞凋亡的效果明顯