RNA干擾LKB1基因?qū)η傲邢侔┘?xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的:探討LKBl/STKll（Liver kinase B1/Serine-Threonine Kinase II）基因沉默對前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3中增殖相關(guān)因子細(xì)胞周期素D1（ cyclinD1）、微小染色體維持缺陷蛋白2（ Mini chromosome maintenance protein2， Mcm2）和增殖細(xì)胞核抗原（ProliferatingCellNuclearAntigen，PCNA）表達(dá)的影響及其可能機(jī)制。

2、　　方法:將重組表達(dá)質(zhì)粒LKB1-shRNA1（LKB1-shRNA1組）和陰性對照質(zhì)粒shNC（陰性對照組）采用脂質(zhì)體介導(dǎo)法轉(zhuǎn)染至前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C-3中，并設(shè)未轉(zhuǎn)染組，經(jīng)G418篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞，RT-PCR法檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞中LKB1、cyclinD1、Mcm2和PCNA基因mRNA的轉(zhuǎn)錄水平；Western blot法檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞中LKB1、cyclinD1、Mcm2和PCNA蛋白表達(dá)水平；CCK-8法檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的增殖