21-羥化酶缺乏癥快速基因診斷技術的研究.pdf

1、目的：21-羥化酶缺乏癥(21-Hydroxylase Deficiency，21-OHD)是先天性腎上腺皮質(zhì)增生癥(Congenital Adrenal Hyperplasia，CAH)最常見的類型，臨床表現(xiàn)主要以雄激素增加和皮質(zhì)醇、醛固酮合成受損為特點，可分為經(jīng)典型和非經(jīng)典型。經(jīng)典型可表現(xiàn)為程度不同的女嬰外生殖器男性化及出現(xiàn)低鈉、低氯、高鉀血癥，若治療不及時，嚴重者可出現(xiàn)失鹽危象而死亡。基于經(jīng)典型較高的發(fā)病率和死亡率，以血清17-羥

2、孕酮(17-OHP)水平作為評價指標的新生兒篩查在臨床上已作為常規(guī)的檢查項目，但由于存在假陰性或假陽性結果，故基因診斷被推薦作為第二梯隊的篩查方法。21-OHD)致病基因CYP21A2是人類最具多態(tài)性的基因之一，真假基因高度同源，突變類型復雜多樣，給基因診斷帶來較大的難度。因此，本研究旨在建立一種臨床上適用的快速準確的基因檢測方法，為患兒提供準確的基因診斷，并為其家庭提供優(yōu)質(zhì)遺傳咨詢服務。
　　 方法：對本實驗室接診的5個臨床診

3、斷為CAH的家系和9名(46，XX)外生殖器男性化患兒聯(lián)合應用多重酶聯(lián)依賴探針擴增(Multiplexligation-dependent probe amplification，MLPA)和特異性擴增測序技術檢測CYP21A2基因突變情況。
　　 結果：MLPA檢測出4例等位基因雜合缺失，1例CYP21A2/CYP21A1P開米拉，并結合測序明確了10名患兒的基因型，其中1172N突變在CAH(SV)患者中最常見。