基因重組野生型p53腺相關(guān)病毒治療膀胱癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、膀胱移行細(xì)胞癌是我國泌尿生殖系最常見的惡性腫瘤。膀胱腫瘤術(shù)后易復(fù)發(fā)為其主要特征，并且復(fù)發(fā)腫瘤往往惡性度逐漸增高。治療膀胱腫瘤以手術(shù)治療和膀胱灌注藥物治療為主，但目前仍未找到有效控制膀胱腫瘤進(jìn)展和復(fù)發(fā)的方法。所以人類在一直致力于探索新的有效的治療方法?；蛑委熃?jīng)過近20多年的歷程正逐步成熟，已逐漸被接受為繼手術(shù)、化療、放療等常規(guī)治療方法之后極有希望的新的疾病治療方法。 由于p53基因在調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和生長、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中發(fā)揮著

2、重要作用，在膀胱腫瘤中p53突變率超過50％，因此利用p53基因治療腫瘤成為研究的熱點(diǎn)。基因?qū)胂到y(tǒng)是腫瘤基因治療的核心技術(shù)，如何將目的基因?qū)霗C(jī)體細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞并獲得安全有效的表達(dá)是這一研究的重點(diǎn)。目前研究和應(yīng)用最多的是腺病毒載體和逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。但是各種病毒載體各有其優(yōu)缺點(diǎn)，如逆轉(zhuǎn)錄病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)的隨機(jī)整合，可以導(dǎo)致原癌基因的激活或功能基因插入失活的潛在危險(xiǎn)。雖然腺病毒載體的研究也取得了進(jìn)展，但也存在著一些問題如：毒副反應(yīng)、有些腺

3、病毒會(huì)引起急性感染、宿主體內(nèi)存在病毒特異性免疫反應(yīng)，腺病毒載體在宿主體內(nèi)表達(dá)時(shí)間短，需要重復(fù)給藥而加劇機(jī)體的免疫排斥反應(yīng)等。因此人們正在尋找新的方法和載體使目的基因能夠高效率地作用于腫瘤細(xì)胞。 腺相關(guān)病毒載體具有逆轉(zhuǎn)錄病毒和腺病毒的許多優(yōu)點(diǎn)，并且與其它幾種病毒相比，腺相關(guān)病毒載體具有安全性好、無致病性、免疫原性低、物理性質(zhì)穩(wěn)定、感染細(xì)胞譜廣，可介導(dǎo)外源基因長期穩(wěn)定表達(dá)等優(yōu)點(diǎn)，被視為最有前途的基因治療載體之一，成為目前基因治療載體

4、研究的熱點(diǎn)。目前腺相關(guān)病毒載體基因治療研究已在代謝性疾病和遺傳性疾病中廣泛開展，但其在膀胱腫瘤基因治療中的研究尚少。本實(shí)驗(yàn)利用腺相關(guān)病毒包裝平臺(tái)-rAAV-Helperfreesystem，分別構(gòu)建攜帶人野生型p53基因和增強(qiáng)綠色熒光蛋白報(bào)告基因的重組腺相關(guān)病毒載體，并初步研究攜帶外源人野生型p53基因的腺相關(guān)病毒載體在人膀胱腫瘤的體外和動(dòng)物體內(nèi)治療作用，同時(shí)觀察其與常用化療藥物順鉑聯(lián)合治療膀胱腫瘤的協(xié)同作用。 本研究共分為三部