兩種植物多糖的提取及對中華絨螯蟹免疫功能影響的研究.pdf

1、以米糠和山藥為材料，采用熱水浸提法，通過單因素和L<,9>(3<'4>)正交試驗，研究了乙醇濃度、提取時間、水料比和提取溫度對米糠和山藥多糖得率的影響。結(jié)果表明，米糠多糖最佳提取工藝為：乙醇濃度95％、提取時間5 h、水料比20：1、提取溫度110℃；山藥多糖最佳提取工藝為：乙醇濃度95％、提取時間3 h、水料比15：1、提取溫度100℃。在此基礎(chǔ)上，研究了微波輔助對兩種多糖得率的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，米糠和山藥經(jīng)650W微波功率在中火力條件

2、下預(yù)處理4 min，再按熱水浸提的最佳工藝進行提取，兩種多糖的得率均明顯提高，分別達到1.33％和2.48％，明顯優(yōu)于常規(guī)熱水浸提法的0.920％和2.025％。 將實驗室自制的兩種植物多糖一米糠多糖(含量77.8％)和山藥多糖(含量71.6％)以10 mgmg和20 mg/kg體重的劑量體腔注射中華絨螯蟹，以生理鹽水注射和不作任何注射的蟹為對照，在注射多糖后的第1、3、5、8 d采樣，對血細胞總量(THC)、不同類型的血細胞數(shù)

3、量(DHC)，血細胞的吞噬活性、呼吸爆發(fā)活性(O<,2><'->產(chǎn)量)，血細胞破碎物上清液(HLS)的總酚氧化酶(PO<,T>)、血清酚氧化酶(PO)、過氧化物酶(POD)、超氧化物岐化酶(SOD)、酸/堿性磷酸酶(ACP/ALP)、過氧化氫酶(CAT)、溶菌酶(LSZ)、溶血素(Hemocytin)及抗菌活性(Ua)進行測定；并在注射多糖后的第3d，從每個處理組中取蟹6只，以1.2x10<'7>cfu/kg體重的劑量體腔注射蟹致病性嗜

4、水氣單胞菌CL99920菌株，記錄接種7 d后各組蟹的累積死亡率。結(jié)果顯示，兩種多糖均能明顯增強中華絨螯蟹的免疫功能和對嗜水氣單胞菌的抗感染能力，而且低劑量組的效果優(yōu)于高劑量組，表明兩種多糖可能都屬于雙向免疫調(diào)節(jié)劑。 本課題還初步研究了兩種植物多糖激活中華絨螯蟹血細胞proPO系統(tǒng)的信號傳導(dǎo)途徑。用適量的多糖和幾種細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的激活劑或抑制劑處理M-199培養(yǎng)的離體中華絨螯蟹血細胞一定時間，通過檢測血細胞胞內(nèi)外酚氧化酶(PO)的