中華絨螯蟹性腺抑制激素純化及其免疫定位的研究.pdf

1、X器官-竇腺?gòu)?fù)合體（X organ-sinus gland system，XO-SG）是位于甲殼動(dòng)物眼柄內(nèi)視上神經(jīng)節(jié)中的重要內(nèi)分泌器官。它合成和分泌甲殼動(dòng)物高血糖素（Crustacean hyperglycemic hormone，CHH）、蛻皮抑制激素（Molt-inhibiting hormone，MIH）、性腺抑制激素（Gonad-inhibiting hormone，GIH）和大顎器抑制激素（Mandibular organ-i

2、nhibitinghormone，MOIH）等多種神經(jīng)類多肽激素，這些激素同屬于CHH家族，具有相似的性質(zhì)和一級(jí)結(jié)構(gòu)。
　　 中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）在各地養(yǎng)殖過(guò)程中普遍發(fā)生一齡蟹性早熟現(xiàn)象，給經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)帶來(lái)了巨大的損失。研究發(fā)現(xiàn)中華絨螯蟹性腺抑制激素的分泌和代謝失調(diào)與其性早熟有著密切的關(guān)系。由于河蟹眼柄視上神經(jīng)節(jié)中神經(jīng)多肽激素的合成很少，性腺抑制激素在X器官-竇腺?gòu)?fù)合體中的含量極低，給分離、純化工作帶來(lái)

3、了一定的困難。
　　 本試驗(yàn)采用高效液相色譜反相層析法（RP-HPLC）分離中華絨螯蟹眼柄視上神經(jīng)節(jié)的激素蛋白提取液，收集其在高血糖激素家族區(qū)域內(nèi)出峰的組分。通過(guò)體內(nèi)注射的方法，檢驗(yàn)每個(gè)分離組分的性腺抑制活性，發(fā)現(xiàn)洗脫液在38-40mL處時(shí)收集到的峰物質(zhì)具有最強(qiáng)的性腺抑制活性。進(jìn)一步純化后，利用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MOLDI-TOF-MS）測(cè)量出其分子量為6800 u。由于此蛋白或多肽在反向?qū)游鲋刑幱诟哐羌に丶易?/p>