一氧化氮合酶對腦損傷后神經(jīng)細胞凋亡的影響.pdf

1、【研究背景】創(chuàng)傷性腦損傷(Traumaticbraininjury,TBI)后存在著原發(fā)和繼發(fā)兩種病理改變。目前的研究認為，凋亡是引起TBI后繼發(fā)性腦損傷的重要原因。腦組織損傷后，神經(jīng)細胞內會出現(xiàn)凋亡和抗凋亡信號的激活，從而調節(jié)神經(jīng)細胞的凋亡過程。Fas和Bcl-2均參與了這一過程。Fas可以促進腦損傷后神經(jīng)細胞的凋亡，而Bcl-2在腦損傷后的抗凋亡過程中起了重要的作用。此外，腦損傷后神經(jīng)細胞的損傷與NO／NOS系統(tǒng)有著密切的關系。NO

2、又稱內皮舒張因子，其生成需要一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase，NOS)的參與。根據(jù)其特點，NOS可分為二種亞型：結構型NOS(constructivenitricoxidesynthase，cNOS)和誘生型NOS(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)。cNOS又包括神經(jīng)型NOS(neuronalNOS，nNOS)和內皮型NOS(endothelialNOS，eNOS)。研究表明，NO

3、與神經(jīng)細胞的凋亡有密切的關系，但是不同的NOS對腦損傷后神經(jīng)細胞凋亡的影響及其與Bcl-2、Fas的關系還不能確定。 【目的】探討腦損傷后，nNOS和iNOS對神經(jīng)細胞凋亡的影響及其相關機制。 【方法】330只大鼠隨機分成以下五組：正常對照組、假手術組、腦創(chuàng)傷組、7-NI(7-Nitroindazole，7-li肖基吲唑。是nNOS抑制劑)組和AG(Aminoguanidine,氨基胍。是iNOS抑制劑)組。后四組分別劃

4、分為傷后3、6、12、24、48、72、168、336小時8個時相組，每個時相組及正常對照組均為10只大鼠。采用Marmarou法制造大鼠重型彌漫性顱腦創(chuàng)傷模型，運用HE染色法觀察了腦損傷后大鼠海馬CAl區(qū)損傷情況，并運用原位末端標記TUNEL法和免疫組織化學法，觀察了各組大鼠腦損傷后的不同時相點，海馬CAI區(qū)的神經(jīng)細胞凋亡情況和Bcl-2、Fas的表達情況。 【結果】1、腦創(chuàng)傷組于傷后6小時，鏡下可見大鼠海馬CAl區(qū)出現(xiàn)散在變

5、性壞死神經(jīng)元，并于傷后72h加重，并觀察到廣泛水腫及神經(jīng)元變性壞死改變，與Marmarou所描述的模型表現(xiàn)大致相符。 2、在正常對照組和假手術組，大鼠海馬CAI區(qū)偶見TUNEL陽性凋亡細胞；在腦創(chuàng)傷組、7-NI組以及AG組，傷后各時相點大鼠海馬CAi區(qū)均出現(xiàn)TUNEL陽性凋亡細胞，隨時間推移，凋亡細胞數(shù)呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢；同腦創(chuàng)傷組同一時相點相比，7-NI組傷后6h、12h及24h和AG組傷后24h、48h、72h及168h

6、的凋亡細胞數(shù)明顯下降(P<0．05)，7-NI組和AG組的其余各時相點的凋亡細胞數(shù)目無明顯改變(P>0．05)。 3、在正常對照組和假手術組，大鼠海馬CAI區(qū)偶見Bcl-2陽性細胞；在腦創(chuàng)傷組、7-NI組以及AG組，傷后各時相點大鼠海馬CAI區(qū)均出現(xiàn)Bcl-2陽性細胞，隨時問推移，Bcl-2陽性細胞數(shù)目呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢；同腦創(chuàng)傷組相比，AG組各時相點的Bcl-2陽性細胞數(shù)無明顯改變(P>0．05)；但在7-NI組傷后6h、

7、12h、24h，同腦創(chuàng)傷組相比，Bcl-2陽性細胞數(shù)明顯增高(P<0．05)，其余各時相點無明顯變化(P>0．05)。 4、在正常對照組和假手術組，偶見Fas陽性細胞；在腦創(chuàng)傷組、7-NI組以及AG組，傷后各時相點大鼠海馬CAl區(qū)均出現(xiàn)Fas陽性細胞，隨時間推移，F(xiàn)as陽性細胞數(shù)呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢；同腦創(chuàng)傷組相比，7-NI組各時相點的Fas陽性細胞數(shù)無明顯改變(P>0．05)；但在AG組傷后24h、48h、72h及168h，