特發(fā)性肺纖維化患者白細(xì)胞介素1受體拮抗劑2號內(nèi)含子數(shù)目可變串聯(lián)重復(fù)序列基因多態(tài)性的研究.pdf

1、目的:通過研究白細(xì)胞介素1受體拮抗劑(IL-1RA)2號內(nèi)含子上數(shù)目可變串聯(lián)重復(fù)序列的基因多態(tài)性與中國河北地區(qū)漢族特發(fā)性肺纖維化的相關(guān)性,并觀察特發(fā)性肺纖維化患者血清IL-IRA、IL—1β蛋白濃度,探討中國河北地區(qū)漢族特發(fā)性肺纖維化患者的遺傳易感因素、發(fā)病機(jī)制及該位點(diǎn)基因多態(tài)性在不同種族特發(fā)性肺纖維化患者易感性方面的差異。
　　 方法:采用基于人群的病例.對照研究方法,參照2002年中華醫(yī)學(xué)會呼吸分會頒布的《特發(fā)性肺(間質(zhì))纖

2、維化診斷和治療指南(草案)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn),選取臨床上確診的特發(fā)性肺纖維化(IPF)的河北地區(qū)漢族患者,共計63例,其中男性40例,女性23例,年齡44歲～87歲,平均(67.3±10.5)歲,且除外繼發(fā)性肺纖維化、急性感染、腫瘤、栓塞、心衰、控制不良的糖尿病、消化性潰瘍、嚴(yán)重骨質(zhì)疏松、結(jié)核病及雖然診斷為IPF,但已經(jīng)接受激素或免疫抑制劑治療的患者。對照組:選擇漢族健康體檢者,共計57例,其中男性32例,女性25例,年齡40歲～73歲,平

3、均年齡(50.6±7.9)歲。且既往無變態(tài)反應(yīng)性疾病病史,近期無感染,無免疫抑制劑應(yīng)用史。采集IPF患者及健康對照者外周靜脈5ml,以蛋白酶K消化-苯酚-氯仿有機(jī)溶劑法和樹脂型TM基因組DNA提純試劑盒提取外周血白細(xì)胞DNA,聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction)方法檢測IPF患者及健康對照人者IL-1RA的2號內(nèi)含子數(shù)目可變串聯(lián)重復(fù)序列的基因組多態(tài)性；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測IPF患者及健康對照組IL-1R

4、A及IL-1β的血清蛋白表達(dá)水平,并進(jìn)行二者比值分析。
　　 結(jié)果:
　　 1白細(xì)胞介素1受體拮抗劑(IL-1RA)2號內(nèi)含子數(shù)目可變串聯(lián)重復(fù)序列的基因多態(tài)性如下:在63例IPF患者中Ⅰ/Ⅰ型、Ⅰ/Ⅱ型、Ⅱ/Ⅱ型和Ⅲ/Ⅲ型分別有51例(80.95％)、11例(17.46％)、0例、1例(1.59％)；57例健康對照者中分別為Ⅰ/Ⅰ型47例(82.46％)、Ⅰ/Ⅱ型6例(10.53％)、Ⅱ/Ⅱ型1例(1.75％)、Ⅲ/Ⅲ型

5、3例(5.26％)。兩組間各種等位基因出現(xiàn)的頻率如下:IPF患者中等位基因Ⅰ出現(xiàn)113次(89.68％)、等位基因Ⅱ出現(xiàn)11次(8.73％)、等位基因Ⅲ出現(xiàn)2次(1.59％)；健康對照組:上述等位基因出現(xiàn)頻率分別為等位基因Ⅰ100次(87.72％)、等位基因Ⅱ8次(7.02％)、等位基因Ⅲ6次(5.26％)。IL-1RA基因2號內(nèi)含子數(shù)目可變串聯(lián)重復(fù)序列的基因多態(tài)性及其各種等位基因頻率在IPF患者及健康對照組之間比較,進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理x2

6、=3.342,P>0.05；x2=2.674,P>0.05,總體分布無顯著性差異。
　　 2血清IL-1RA、IL-1β蛋白濃度變化
　　 2.1血清IL-1 RA蛋白濃度變化:IPF患者與健康對照組分別為:312.07±221.50、700.35±646.00,IPF患者血清IL-1RA蛋白濃度低于健康對照組,兩組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(p〈0.05)。
　　 2.2血清IL-1β蛋白濃度變化:IPF患者與健康對照

7、組分別為:395.41±40.83、19.49±10.44,IPF患者血清IL-1β蛋白濃度較健康對照組明顯增高,兩組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 2.3用IL-1RA/IL-1β蛋白濃度得出二者比值。IPF患者與健康對照組分別為:4.10±4.83、41.95±41.30,IPF患者二者比值低于健康對照組,兩組比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1結(jié)合本研究推測IL-1RA2