迷走神經(jīng)調(diào)節(jié)胰腺外分泌的神經(jīng)傳遞機(jī)制的研究.pdf

1、胰腺為人體重要的器官，兼有外分泌和內(nèi)分泌的功能。其外分泌的產(chǎn)物胰酶是重要的食物水解酶。目前大多數(shù)的胰腺疾病都會(huì)引起胰腺外分泌功能的改變，因而機(jī)體如何調(diào)節(jié)胰腺外分泌液備受重視。目前對(duì)于胰腺外分泌的研究認(rèn)為：胰腺外分泌由體液因素和神經(jīng)因素共同調(diào)節(jié)，且兩者間有相互的作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)CCK、促胰液素和許多物質(zhì)對(duì)胰腺外分泌的調(diào)節(jié)均與乙酰膽堿能神經(jīng)有著密切的關(guān)系，因此對(duì)于胰腺外分泌的神經(jīng)調(diào)節(jié)的研究是非常必要的。而在胰腺外分泌的神經(jīng)調(diào)控中，迷走神

2、經(jīng)和迷走神經(jīng)背核起到了重要的作用，因此本項(xiàng)研究主要就針對(duì)這二者進(jìn)行胰腺外分泌的神經(jīng)傳遞機(jī)制的研究。 1.腸道灌注5-HT后迷走神經(jīng)節(jié)c-Fos、谷氨酸受體、P物質(zhì)受體的表達(dá)目的：本部分實(shí)驗(yàn)主要探討生理狀態(tài)下，大鼠十二指腸受到不同灌注刺激后，迷走神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的活動(dòng)性。方法：實(shí)驗(yàn)分四組：假手術(shù)，灌注去離子水，灌注5％的NaCl，灌注10-4mol/L的5-HT，每組10只，在十二指腸內(nèi)恒流灌注相同時(shí)間，假手術(shù)組不灌注，然后對(duì)迷走神經(jīng)

3、節(jié)切片進(jìn)行c-Fos免疫組化染色，和c-Fos-NK1-R和c-Fos-NMDA-R2ab雙重免疫組化染色，統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果：灌注5％的NaCl和灌注10-4mol/L的5-HT組的迷走神經(jīng)節(jié)切片出現(xiàn)顯著的c-Fos陽(yáng)性結(jié)果，并且伴有NK1-R、NMDA-R2ab的大量表達(dá)。結(jié)論：在大鼠十二指腸的灌注中，5％的NaCl和10-4mol/L的5-HT可以將迷走神經(jīng)通路上傳到迷走神經(jīng)節(jié)，并且表達(dá)谷氨酸和P物質(zhì)受體。 2.迷走神經(jīng)背核(

4、DMN)逆向追蹤研究目的：本部分實(shí)驗(yàn)主要探討生理狀態(tài)下，胰腺中注射有CTB熒光標(biāo)記的大鼠十二指腸受到10-4mol/L的5-HT灌注刺激后，迷走神經(jīng)背核(DMN)的神經(jīng)元的活動(dòng)性。方法：實(shí)驗(yàn)分三組：A組10只，注射CTB，有灌注；B組1只，注射CTB，無(wú)灌注；C組1只，注射生理鹽水，有灌注。然后對(duì)迷走神經(jīng)背核的切片進(jìn)行CTB雙重免疫染色，并對(duì)c-Fos、ChAT、NK1-R和NMDA-R2ab的表達(dá)進(jìn)行熒光染色。結(jié)果：A組：CTB陽(yáng)性，

5、c-Fos、ChAT、NK1-R和NMDA-R2ab均陽(yáng)性；B組：CTB陰性，其他也為陰性；C組：CTB陰性，其他均為陽(yáng)性。結(jié)論：十二指腸5-HT的灌注，引起胰腺神經(jīng)元將信號(hào)通過(guò)迷走神經(jīng)傳遞給DMN。信號(hào)傳遞給DMN的過(guò)程中，伴隨著c-Fos、ChAT、NK1-R、NMDA-R2ab的高表達(dá)。 3.SP、NPY、SS在迷走神經(jīng)運(yùn)動(dòng)背核中對(duì)胰腺外分泌的調(diào)節(jié)作用目的：觀察迷走神經(jīng)背核微量注射SP、NPY、SS，對(duì)胰腺神經(jīng)元的影響。方

6、法：實(shí)驗(yàn)分四組：A組10只，注射人工腦脊液；B組10只，注射P物質(zhì)(SP)；C組10只，注射神經(jīng)肽Y(NPY)；D組10只，注射生長(zhǎng)抑素(SS)。然后對(duì)胰腺的切片進(jìn)行c-Fos免疫組化染色，并對(duì)ChAT、GRP的表達(dá)進(jìn)行雙重?zé)晒馊旧?。結(jié)果：SP和NPY能夠促進(jìn)胰腺內(nèi)神經(jīng)元的c-Fos表達(dá)，并伴有ChAT、GRP的高表達(dá)；SS抑制胰腺內(nèi)神經(jīng)元的c-Fos表達(dá)，而且ChAT、GRP也較少表達(dá)。結(jié)論：SP和NPY作用于迷走神經(jīng)背核能促進(jìn)胰腺的