急性肺損傷幼鼠肺Ⅱ型上皮細(xì)胞和SP-A及SP-D變化及地塞米松干預(yù)研究.pdf

1、急性肺損傷(Acutelunginjury，ALI)和急性呼吸窘迫綜合征(Acuterespiratorydistresssyndrome，ARDS)是指由心源性以外的各種肺內(nèi)外致病因素所導(dǎo)致的一種肺部炎癥和通透性增加綜合征，以彌漫性肺泡毛細(xì)血管損傷導(dǎo)致的肺水腫和微肺不張為病理特征，進而導(dǎo)致急性的、進行性缺氧性呼吸衰竭。目前認(rèn)為ALI/ARDS的本質(zhì)是機體過度炎癥反應(yīng)導(dǎo)致肺血管內(nèi)皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞廣泛破壞的結(jié)果。ALI和ARDS是危及

2、各個年齡段的臨床危重癥，是兒科常見和潛在危害極大的疾病之一。國外近年分析ALI占兒科重癥監(jiān)護病房(PICU)收治患兒的10％，我國目前臨床估計ALI患兒占小兒危重癥的5％～10％，或更高。小兒可以因肺發(fā)育不成熟(如早產(chǎn))、肺內(nèi)外因素導(dǎo)致肺部感染和炎癥、吸入、溺水、中毒、外傷、人工輔助通氣、免疫低下等誘發(fā)因素所致ALI。ALI是ARDS的早期階段，重度的ALI即為ARDS。國內(nèi)最新調(diào)查資料顯示，ARDS患兒的病死率達到60％以上。小兒AL

3、L/ARDS已成為臨床危重醫(yī)學(xué)的研究重點。 肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(AlveolarepithelialcellⅡcell，AEC-Ⅱ)具有合成和分泌肺表面活性物質(zhì)(Pulmonarysuffactant，PS)的作用。PS由膽固醇、磷脂和蛋白質(zhì)組成。PS具有降低肺泡表面張力和維持氣道內(nèi)液體平衡等重要生理作用。肺表面活性物質(zhì)蛋白(Pulmonarysurfactantprotein，SP)包括蛋白質(zhì)A、B、C、D(SP-A、SP-B、

4、SP-C、SP-D)。其中的SP-A、SP-D具有肺局部先天性免疫功能，能凝聚病原微生物，對免疫細(xì)胞具有趨化作用和調(diào)理吞噬作用。 自從上個世紀(jì)70年代SP-A被認(rèn)識以來，人們對SP-A等SP進行了大量的實驗研究。研究結(jié)果表明：在LPS誘導(dǎo)的ALI中，肺組織和肺泡灌洗液(Bronchialalveolarlavagefluid，BALF)中的SP-A和SP-D發(fā)生相應(yīng)變化。氣管內(nèi)滴注LPS能使SP-A和SP-D升高。1998年Fe

5、hrenbach報道了在LPS誘導(dǎo)的ALI中AEC-Ⅱ和LB的早期改變。從2003年開始，國內(nèi)陸續(xù)報道了對ALI/ARDS大鼠AEC-Ⅱ超微結(jié)構(gòu)研究結(jié)果。2005年報道了LPS誘導(dǎo)的新生大鼠和成年大鼠ALI時AEC-Ⅱ的變化。在AIL和ARDS中，PS系統(tǒng)的變化是重要的發(fā)病機制之一，許多文獻已經(jīng)闡明SP-A、SP-D與呼吸系統(tǒng)疾病密切相關(guān)。 迄今國內(nèi)外尚未從超微結(jié)構(gòu)、基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)三個層面對LPS誘導(dǎo)的ALI的AEC-Ⅱ、

6、SP-AmRNA、SP-DmRNA、SP-A和SP-D等進行同步深入系統(tǒng)的動態(tài)研究，包括Dexamethasone對LPS誘導(dǎo)的ALI的干預(yù)研究。國際上對ALI時SP-D在肺組織中的變化尚未明確。國內(nèi)至今仍未見關(guān)于SP-D的研究報道。 本論文旨在分別從基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、超微形態(tài)學(xué)三個層面立體雙軌動態(tài)研究LPS所致的ALI中AEC-Ⅱ的超微結(jié)構(gòu)、肺組織SP-AmRNA、SP-DmRNA、SP-A和SP-D隨時間變化的規(guī)律和De

7、xamethasone干預(yù)后對它們的影響，從而探索ALI時的發(fā)病機制，為臨床精確有效治療奠定實驗基礎(chǔ)。 結(jié)論： 1.AEC-Ⅱ損傷是LPS誘導(dǎo)ALI的早期特征，ALI與AEC-Ⅱ的細(xì)胞器、細(xì)胞核的損傷密切相關(guān)，且不同時間段各種細(xì)胞器的損傷程度不同。 2.Dexamethasone在ALI階段對于促進PS的分泌、細(xì)胞增殖、減輕AEC-Ⅱ中LB等損傷、穩(wěn)定細(xì)胞核、抑制細(xì)胞凋亡等方面均起到了積極地作用。 3.在

8、Dexamethasone作用下，AEC-Ⅱ內(nèi)LB的重新分布排列，為加強AEC-Ⅱ的分泌奠定了基礎(chǔ)。Mi過度失代償為這個過程提供能量。這些變化預(yù)示肺泡上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)的修復(fù)和功能的恢復(fù)。 4.LPS可使肺組織SP-AmRNA和SP-DmRNA隨時間呈不同的下降趨勢，并在一定時期處于最低階段。Dexamethasone可使SP-AmRNA和SP-DmRNA表達水平明顯上調(diào)。 5.肺組織SP-A、SP-D的含量在ALI的早期無明

9、顯變化，隨后出現(xiàn)SP-A上升和SP-D下降的變化趨勢，這種SP-A與SP-D走向“分離”的現(xiàn)象說明肺組織SP-A的代償能力大于SP-D的代償能力。這可能與AEC-Ⅱ結(jié)構(gòu)與功能的恢復(fù)以及AEC-Ⅱ的增生密切相關(guān)，包括LB的二次“重新排列”。 6.ALI肺組織SP-D處于最低水平時SD幼鼠死亡最多，可能提示肺組織SP-D的含量在ALI過程早期與疾病的嚴(yán)重程度和病程轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)，且相關(guān)程度大于SP-A。但不排除SP-A與SP-D有協(xié)同