熱應激小鼠囊胚孵出率及其熱休克蛋白70表達的研究.pdf

1、以昆明雌性小白鼠為受試動物，將體外培養(yǎng)至擴張囊胚(hCG后113h)的小鼠胚胎分別施以38℃溫和熱應激和40℃強烈熱應激處理1h，2h和3h，然后在37℃正常培養(yǎng)條件下分別恢復3h，2h和1h，用體視顯微鏡觀察hCG后161h的囊胚孵出率以及經38℃和40℃誘導熱應激后囊胚的孵出率，用Western blot技術檢測小鼠囊胚HSP70及HSP72的表達，以研究小鼠囊胚的熱敏性、熱應激對小鼠囊胚HSP70及HSP72表達的影響以及囊胚熱耐

2、受的獲得與HSP72表達之間的關系。試驗結果如下： 1.熱應激對囊胚孵出率的影響。熱應激組囊胚孵出率均低于對照組，40℃熱應激處理不同時間各組囊胚孵出率(分別為58.53％，47.85％和45.28％)均低于38℃熱應激處理的各相應組(分別為62.98％，57.35％和51.27％)。熱應激處理2h和3h時，40℃熱應激組的囊胚孵出率(分別為47.85％和45.28％)顯著(P<0.05)低于38℃熱應激組(57.35％和51.

3、27％)；熱應激處理1h時，囊胚孵出率在38℃和40℃組間無顯著差異(P>0.05)。 在38℃和40℃熱應激組，囊胚孵出率均隨著熱應激時間的延長而降低。38℃組內熱應激處理1h，2h和3h囊胚孵出率分別為62.98％，57.35％和51.27％，三組之間差異顯著(P<0.05)；40℃熱應激處理1h囊胚孵出率(58.53％)顯著(P<0.05)高于熱應激處理2h(47.85％)和3h(45.28％)；囊胚孵出率在40℃熱應激處

4、理2h(47.85％)和3h(45.28％)之間無顯著差異(P>0.05)。 2.誘導熱應激對囊胚孵出率的影響。先經38℃熱誘導1h，2h和3h，再經40℃強烈熱應激處理2h后囊胚的孵出率(49.18％，54：74％和53.36％)均高于40℃強烈熱應激處理2h組(47.85％)。其中38℃熱誘導2h囊胚孵出率最高(54.74％)，與40℃強烈熱應激處理2h組(47.85％)相比差異顯著(P<0.05)。 3.熱應激對囊

5、胚HSP70表達的影響。38℃熱應激組內，囊胚HSP70表達量隨熱應激時間的延長呈增加趨勢。38℃熱應激處理3h囊胚HSP70表達量(1.11)顯著(P<0.05)高于對照組(0.94)；38℃熱應激處理1h和2h襲胚HSP70表達量(0.96和0.97)與對照組(0.94)相比無顯著差異(P>0.05)。 40℃熱應激組囊胚HSP70表達量隨熱應激時間的延長先減少后增加。40℃熱應激處理1h和3h囊胚HSP70表達量(1.17和1.1

6、3)均顯著(P<0.05)高于對照組0.97的表達量；40℃熱應激處理2h囊胚HSP70表達量(0.92)與對照組(0.97)相比無顯著差異(P>0.05)。 4.熱應激對囊胚HSP72表達的影響。對照組和38℃、40℃熱應激組的囊胚均有HSP72的表達。其中，38℃熱應激處理211囊胚HSP72表達量(0.85)顯著(P<0.05)高于對照組(0.66)；38℃熱應激處理1h和3h囊胚HSP72表達量(0.72和0.78)均高