ET-1在糖尿病腎病大鼠腎小管上皮轉(zhuǎn)分化中的作用及冬蟲夏草對(duì)其干預(yù)的影響.pdf

1、目的：觀察高糖刺激下腎組織中ET-1表達(dá)水平及腎小管上皮轉(zhuǎn)分化相關(guān)蛋白α-SMA及E-cadherin的表達(dá)狀況,并用冬蟲夏草原液進(jìn)行干預(yù)實(shí)驗(yàn),觀察上述蛋白表達(dá)的變化,進(jìn)一步探討糖尿病腎病腎纖維化的發(fā)病機(jī)制,以及冬蟲夏草對(duì)這一病理過程的保護(hù)作用機(jī)理。
　　 方法：對(duì)10只Wistar大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ,60mg/kg),誘導(dǎo)成DM模型,DM模型成功4周后測(cè)24小時(shí)尿蛋白定量,如24小時(shí)尿蛋白大于30mg即認(rèn)為DN模型

2、成功,隨機(jī)分為模型組、蟲草組,每組各5只。另將5只鼠齡、體重相匹配的大鼠作為正常組。蟲草組予冬蟲夏草粉混懸液1.0g/(kg*d),對(duì)照組等量生理鹽水灌胃。于干預(yù)實(shí)驗(yàn)后第4周處死大鼠每組5只。處死前測(cè)24小時(shí)尿蛋白定量,處死后留血標(biāo)本測(cè)血肌酐；取腎組織進(jìn)行HE巳及MASSON染色,觀察腎臟組織形態(tài)學(xué)變化；用免疫組化方法檢測(cè)腎組織中ET-1、α-SMA和E-Cadherin蛋白的表達(dá)；用RT-PCR的方法檢測(cè)ET-1、α-SMA和E-Ca

3、dherin的mRNA表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.糖尿病腎病大鼠腎組織中,ET-1產(chǎn)生增加、α-SMA的表達(dá)上調(diào),E-Cadherin表達(dá)減少(p＜0.05或p＜0.01)。ET-1與α-SMA呈正相關(guān),與E-Cadherin呈負(fù)相關(guān)(p＜0.01),提示ET-1可誘導(dǎo)腎小管上皮轉(zhuǎn)分化,促進(jìn)腎間質(zhì)纖維化發(fā)生(p＜0.01).
　　 2.模型組大鼠24小時(shí)尿蛋白、血肌酐水平升高,腎組織出現(xiàn)腎小球肥大、炎癥細(xì)胞浸

4、潤(rùn)、細(xì)胞外基質(zhì)增多,腎間質(zhì)纖維化等病理變化。(p＜0.05或p＜0.01)3.冬蟲夏草干預(yù)糖尿病腎病大鼠,能明顯減少大鼠的尿蛋白排泄量,延緩血清肌酐升高,減輕糖尿病腎病的腎臟病理改變(p＜0.05或p＜0.01)；同時(shí),腎組織中ET-1分泌減少、α-SMA表達(dá)下調(diào)、E-Cadherin表達(dá)上調(diào)(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.ET-1在糖尿病腎病中具有誘導(dǎo)腎小管上皮轉(zhuǎn)分化和促進(jìn)腎纖維化的作用。