射波刀治療白血病結(jié)節(jié)的離體細胞劑量學研究.pdf

1、目的：通過對離體人慢性髓細胞性白血病急變期細胞K562細胞系進行單次不同劑量的照射，比較其在不同時間對細胞造成的損傷方式以及細胞對損傷的修復機制和效果，得出輻射對K562細胞的劑量.效應(yīng)關(guān)系和時間.并對臨床應(yīng)用射波刀治療白血病髓外結(jié)節(jié)病灶進行初步驗證和療效觀察。 方法：取對數(shù)生長期K562細胞分別給予0Gy、1Gy、2Gy、3Gy、5Gy、10Gy、15Gy、20Gy6MV-X線照射，并于照射后2小時、24小時、48小時收集細胞

2、，采用ANNEXIN-V/PI雙染色法流式細胞儀檢測細胞凋亡百分率變化，PI單染色法流式細胞儀檢測細胞周期阻滯情況，并采用MTT比色法和克隆形成法檢測照射后細胞的生長抑制和活性，綜合以上幾種方法檢測結(jié)果并以SPSS12.0進行統(tǒng)計分析，得出不同照射劑量和時間對離體白血病細胞的殺傷作用方式，以及細胞對損傷進行修復的能力，最后通過對臨床病例療效分析對所獲實驗室研究結(jié)果進行初步驗證。 結(jié)果：1、根據(jù)實驗結(jié)果可將輻射劑量大致分為三個區(qū)間

3、組進行比較，分別是低劑量組(1～2Gy)、中等劑量組(3～5Gy)和高劑量組(10～20Gy)： 2、低劑量組細胞照射后2小時即出現(xiàn)凋亡，且凋亡率隨劑量增加而增加(p<0.05)，凋亡峰出現(xiàn)在照射后24小時，此時出現(xiàn)短暫的S期阻滯，48小時后凋亡率減少，但沒有統(tǒng)計學意義，細胞周期逐漸恢復，細胞生長無明顯抑制，2周后檢測克隆形成能力強(85％～93％)； 3、中劑量組細胞照射后2小時即出現(xiàn)細胞周期S期阻滯，24小時進入G2

4、/M期阻滯，48小時后部分恢復細胞增殖周期，期間細胞凋亡率沒有明顯變化(p>0.05)，隨劑量增加凋亡率沒有統(tǒng)計學差異但總凋亡率高于低劑量組(p<0.05)，72小時后細胞生長抑制率增加，2周后克隆形成率低(49％～71％)，p值均小于0.05； 4、高劑量組細胞照射后2小時出現(xiàn)短暫的S期阻滯后進入持續(xù)的G2/M期阻滯，同時細胞凋亡率隨時間延長逐漸增加(p<0.05)，但各劑量點間同一時間點凋亡率無明顯差別(p>0.05)，總凋

5、亡率高于中、低劑量組(p<0.05)，72小時后細胞生長明顯被抑制(p<0.01)，2周后檢測很少或無克隆形成(0～23％)； 5、臨床應(yīng)用射波刀治療白血病髓外結(jié)節(jié)6～17Gy/1～3f照射后病灶局部控制率達到100％，耐受良好，無明確治療相關(guān)副作用發(fā)生，但受病例數(shù)較少和隨訪時間不足所限尚未能獲得統(tǒng)計學檢驗結(jié)果。 結(jié)論：1、K562細胞經(jīng)1～2GyX線照射后發(fā)生亞致死性損傷，單次照射后48小時后可基本恢復，損傷隨劑量增加