版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、石斛蘭(Dendrobium)是國際花卉市場上最受歡迎的蘭花切花和盆花品種之一,但其易受細菌性軟腐病侵染,令生產者蒙受巨大損失。蘇云金芽胞桿菌(Bacillusthuringiensis,Bt)的aiiA基因編碼的AiiA蛋白能降解N-乙酰高絲氨酸內酯(N-acylhomoserine lactones,AHLs),可以明顯抑制馬鈴薯軟腐病的發(fā)生。使用轉基因技術導入外源抗病基因是目前蘭花抗病育種的新方向,但目前的蘭花遺傳轉化系統(tǒng)還不成熟
2、。本論文以石斛蘭大熊貓1號(D.Ekapol‘PANDA No.1’)為材料,應用農桿菌介導的方法將Bt的aiiA基因轉入石斛蘭,并對轉化條件進行了優(yōu)化,以研究研的AiiA蛋白對防治石斛蘭軟腐病的影響,并提高石斛蘭的轉化效率。 本研究通過PCR方法從Bt中克隆了aiiA基因,在雙元轉化載體pCAMBIA1301(含有潮霉素選擇標記基因)基礎上構建了分別受花椰菜花葉病毒35S(CauliflowerMosaic’Virus 35S
3、 promoter,CaMV 35S)啟動子和玉米泛素啟動子(maize ubiquitinpromoter)控制的表達載體pSAN和pUAN,以期比較這兩種啟動子在轉基因石斛蘭中的表達效果。 將pSAN和pUAN分別導入農桿菌LBA4404或EHA105,獲得了4種工程菌,并比較了它們轉化石斛蘭的效率。GUS瞬時表達結果表明,帶有pSAN或pUAN的EHA105均能比帶有pSAN或pUAN的LBA4404更有效地轉化石斛蘭。
4、 使用含有pSAN和pUAN的EHA105轉化石斛蘭,經過了4個月的選擇培養(yǎng),已獲得一批潮霉素抗性的石斛苗。對部分抗性苗的葉片進行了GUS染色,結果表明該基因已穩(wěn)定表達。用含有pUAN的EHA105轉化石斛蘭,研究了不同菌液濃度(OD<,600>)、侵染液添加或不添加乙酰丁香酮(acetosyringone,AS)對轉化效率的影響。GUS瞬時表達結果表明,只有當農桿菌生長至OD<,600>值為0.8時,添加AS能略為提高轉化效率,
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 蘇云金芽胞桿菌gerE基因功能的研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌sigL基因功能的研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌芽胞和晶體形成相關功能基因研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌活性基因的克隆及其表達.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌殺蟲基因的鑒定與克隆.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌幾丁質酶活性研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌制劑檢測方法的研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌Zwittermicin A生物合成相關基因的功能研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌對云斑天牛的抗性研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌G03的芽胞形成相關基因對cry基因表達的影響.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌營養(yǎng)期殺蟲蛋白的研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌gab基因簇表達與調控的研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌處理含Cr(Ⅵ)廢水的研究.pdf
- 雅安周公山蘇云金芽胞桿菌基因資源研究和殺蟲基因的克隆.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌新cry基因克隆、表達與殺蟲功能研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌代謝網絡的重建與分析.pdf
- 13855.蘇云金芽胞桿菌轉錄調控因子cody的靶基因研究
- YvoA蛋白對蘇云金芽胞桿菌幾丁質酶基因表達調控的研究.pdf
- 蘇云金芽胞桿菌抗病工程菌的構建.pdf
- 雙價基因轉化石斛蘭的研究.pdf
評論
0/150
提交評論