家族性慢性良性天皰瘡的ATP2C1基因突變研究.pdf

1、家族性慢性良性天皰瘡的 ATP2C1 基因突變研究研究背景家族性慢性良性天皰瘡，又稱 Hailey-Hailey 病 (Hailey-Hailey disease，HHD，OMIM 169600)，由Hailey兄弟于1939年首次報(bào)道。該病是一種罕見(jiàn)的常染色體顯性遺傳性皮膚病，臨床以皮膚皺褶部位反復(fù)出現(xiàn)水皰和糜爛為特征。出汗、摩擦、皮膚感染等外界因素可引起發(fā)病或加重病情。組織病理顯示表皮內(nèi)棘層松解，基底層上方裂隙及水皰形成，皰內(nèi)可見(jiàn)棘

2、層松解細(xì)胞，基底層上如倒磚墻樣外觀。超微結(jié)構(gòu)顯示棘細(xì)胞橋粒數(shù)目減少，張力細(xì)絲與橋粒分離，核周電子致密物質(zhì)聚集。基因連鎖分析將HHD致病基因定位于染色體3q21-q24，有研究表明 ATP2C1 基因的異常是HHD的致病原因，ATP2C1基因編碼人類分泌途徑鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶 1 (human secretory pathway Ca<'2+>/Mn<'2+>-ATPase protein 1，hSPCA1)。自從報(bào)道 ATP2C1 基因

3、為致病基因以來(lái)，一系列錯(cuò)義突變、框移突變、剪切位點(diǎn)突變和無(wú)義突變被發(fā)現(xiàn)?；蛐团c表型的關(guān)聯(lián)研究并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)基因突變位點(diǎn)與HHD的臨床表型之間存在相關(guān)性。本研究收集中國(guó)漢族人HHD 4個(gè)家系和2個(gè)散發(fā)病例，并通過(guò)直接測(cè)序的方法對(duì)這4個(gè)家系和2個(gè)散發(fā)病例成員進(jìn)行ATP2C1基因的突變檢測(cè)。 目的：檢測(cè)中國(guó)漢族人HHD 4個(gè)家系和2個(gè)散發(fā)病例的ATP2C1基因的致病性突變。 方法：收集中國(guó)漢族人HHD 4個(gè)家系和2個(gè)散發(fā)病例及其

4、家庭成員的外周血標(biāo)本，采用改良鹽析法提取外周血白細(xì)胞中的 DNA，設(shè)計(jì)覆蓋ATP2C1基因所有外顯子編碼區(qū)的26對(duì)引物，采用PCR反應(yīng)擴(kuò)增所有外顯子編碼區(qū)及其側(cè)翼序列，通過(guò)對(duì)PCR反應(yīng)產(chǎn)物直接測(cè)序進(jìn)行序列分析。 結(jié)果：在HHD 4個(gè)家系和l 2個(gè)散發(fā)病例中共發(fā)現(xiàn)4個(gè)新的雜合性突變，包括2個(gè)剪切位點(diǎn)突變(家系1：235－2 A→G；散發(fā)病例1：117+2 T→G)，1個(gè)無(wú)義突變W285X(家系2：854 G→A)和1個(gè)錯(cuò)義突變G5