洛鉑對MCF-7細胞凋亡及MTDH基因表達的影響.pdf

1、目的：
　　乳腺癌是危害婦女健康的最常見的惡性腫瘤，發(fā)病率高，晚期乳腺癌常常發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移，是導致患者死亡的根本原因，因此抑制腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移對腫瘤患者的治療至關重要。近年來研究發(fā)現(xiàn)MTDH基因在乳腺癌中過度表達,是一種具有參考價值的預后分子。MTDH基因在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用，包括促進腫瘤細胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移、避免凋亡及使腫瘤細胞對化療藥物產(chǎn)生耐藥。MTDH基因有望成為抑制腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的有效靶點。
　　鉑類是晚期乳腺

2、癌化療的常規(guī)用藥，以順鉑（cDDP）為基礎的化療已廣泛應用在乳腺癌的治療中，并取得了一定的療效，但是由于順鉑嚴重的腎毒性和胃腸道反應限制了它在臨床的應用，因此開發(fā)高效低毒的鉑類藥物一直是學者們研究的目標。洛鉑是第三代鉑類衍生物，洛鉑以其較輕的毒副作用、與順鉑不完全交叉耐藥以及較強的抗腫瘤效應，已初步顯示了其在腫瘤治療中的重要作用。本實驗以人乳腺癌細胞株MCF-7為模型，采用MTT比色法、流式細胞技術(shù)檢測洛鉑對MCF-7細胞增殖及凋亡誘導

3、作用，應用RT-PCR方法檢測MTDH基因表達，初步探討洛鉑對乳腺癌MCF-7細胞的增殖、凋亡及對MTDH基因表達的影響。為洛鉑在乳腺癌化療中的應用提供實驗依據(jù)。
　　方法：
　　1.使用MTT比色法檢測洛鉑對細胞的增殖抑制情況。
　　2.應用流式細胞儀檢測洛鉑作用48h后MCF-7細胞凋亡率的改變。
　　3.應用RT-PCR法檢測洛鉑作用48h后MTDH基因表達的變化。
　　結(jié)果：
　　1.不同濃度

4、洛鉑（5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L）在同一時間抑制率與對照組比較均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。同一濃度洛鉑作用24、48、72小時抑制率與對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。洛鉑能明顯抑制乳腺癌MCF-7細胞的增殖，抑制率隨著藥物濃度的增加而增加，有劑量依賴關系；抑制率并隨著藥物作用時間的延長而增加，有時間依賴關系。
　　2.不同濃度洛鉑5mg/L、10mg/L、15mg/L作用于MCF-7細胞

5、48h后凋亡率分別為19.39±0.67％，24.53±1.20％，65.02±0.78％，隨著洛鉑濃度的增高，細胞凋亡的比例增加，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。洛鉑對MCF-7細胞凋亡的影響呈劑量依賴性。洛鉑可通過誘導MCF-7細胞凋亡進而影響其增殖。
　　3.對照組及不同濃度洛鉑組(5mg/L、10mg/L、15mg/L)作用乳腺癌MCF-7細胞48h后，可見GAPDH mRNA在各組中均有表達。隨著洛鉑作用濃