骶髓上損傷及BOO后肌源性逼尿肌興奮改變的對照研究.pdf

1、背景及目的：骶髓上損傷(Suprasacral cord injury，SSCI)會導(dǎo)致逼尿肌反射亢進(Dtrusor hyperreflexia，DH)，出現(xiàn)膀胱排尿、貯尿功能障礙，因其原發(fā)誘因為脊髓損傷，既往對DH發(fā)病機理的研究多進行的是神經(jīng)病理研究，傳統(tǒng)理論主要認為骶髓上損傷后骶髓排尿中樞失去高位中樞的控制因而發(fā)生DH，但這些理論對神經(jīng)病變后逼尿肌水平如何發(fā)生DH的下游機制理解釋不清。膀胱的排尿、貯尿涉及神經(jīng)和肌肉兩個方面，這兩個

2、方面或其中一方發(fā)生病變即可導(dǎo)致膀胱排尿、貯尿功能障礙，對其發(fā)病機理的研究可從神經(jīng)和肌肉兩個方面進行，骶髓上損傷后逼尿肌興奮收縮功能必然發(fā)生繼發(fā)性改變，逼尿肌的這種繼發(fā)的肌源性改變可能與DH的發(fā)生密切相關(guān)，研究骶髓上損傷后肌源性逼尿肌興奮改變，可更好的弄清骶髓上損傷后膀胱排尿、貯尿功能障礙的機理，對脊髓損傷后如何更好的保護和恢復(fù)膀胱功能有指導(dǎo)意義，然而既往缺乏這一方面的研究。 骶髓上損傷后出現(xiàn)的DH，表現(xiàn)為在膀胱充盈少量尿液后即出

3、現(xiàn)具有一定強度(壓力超過15cmH<,2>O)人為意識不能抑制的逼尿肌收縮；膀胱流出道梗阻(Bladder outletobstruct，BOO)可引起逼尿肌不穩(wěn)定(Dtrusor instability，DI)，DI的表現(xiàn)與DH的表現(xiàn)相似，近年來大量研究顯示：DI逼尿肌組織自身的興奮性增強，據(jù)此提出了發(fā)生DI的肌源性理論，骶髓上損傷后DH的發(fā)生除有神經(jīng)損傷誘因外，有無肌原性因素、其與DI逼尿肌興奮性改變有何異同尚不清楚。對比研究骶髓上

4、損傷和BOO后逼尿肌興奮收縮功能改變的異同，可明確在逼尿肌水平DH和DI的發(fā)生有無共同通路，從而從逼尿肌的肌源性改變方面探討DH的發(fā)病機理。 骶髓上損傷后逼尿肌繼發(fā)的肌源性改變包括興奮收縮功能改變及順應(yīng)性改變，其興奮性改變與DH密切相關(guān)，順應(yīng)性改變影響到膀胱的貯尿功能。與逼尿肌興奮有關(guān)的因素有興奮的產(chǎn)生和傳導(dǎo)，與順應(yīng)性有關(guān)的因素有肌動蛋白、Ⅲ型、Ⅰ型膠原纖維含量，進行諸多方面的研究有助于弄清骶髓上損傷后膀胱排尿貯尿功能障礙與逼尿

5、肌肌源性改變之間的關(guān)系。 研究表明逼尿肌興奮主要由鈣通道開放鈣內(nèi)流引起，其節(jié)律性收縮與胞內(nèi)鈣庫節(jié)律性釋放鈣形成的鈣震蕩有關(guān)，因此鈣離子與逼尿肌的興奮和收縮關(guān)系尤為密切。逼尿肌細胞膜上存在著L型和T型兩種鈣通道，鈣震蕩是由胞外鈣進入胞內(nèi)引起肌織網(wǎng)內(nèi)鈣大量釋放，當鈣達到一定濃度后再通過負反饋而抑制鈣釋放所形成，平滑肌的節(jié)律性收縮由此形成，因此研究骶髓上損傷后逼尿肌細胞鈣通道性狀及細胞內(nèi)鈣震蕩的改變對弄清骶髓上損傷后逼尿肌興奮性改變有

6、重要意義。逼尿肌細胞間的興奮是通過縫隙連接進行傳導(dǎo)的，縫隙連接蛋白Connnexin43是縫隙連接的重要組成蛋白，其表達的改變可反映逼尿肌興奮傳導(dǎo)的改變。本課題擬對比研究骶髓上損傷和BOO后逼尿肌興奮收縮功能改變的異同，觀察肌源性因素在神經(jīng)源性膀胱排尿貯尿功能障礙中的作用，探討逼尿肌反射亢進的發(fā)病機理。 方法：建立骶髓上損傷及：BOO動物模型，圍繞正常組、骶髓上損傷組及BOO組之間的對比進行以下研究：1、尿動力學(xué)檢測各組在體和離

7、體膀胱功能改變異同，觀察各組膀胱功能改變與有無神經(jīng)支配的關(guān)系；2、進行逼尿肌條體外機械牽拉刺激試驗檢測骶髓上損傷及BOO后逼尿肌興奮性改變異同；3、進行植物神經(jīng)制劑作用試驗，檢測各組逼尿肌對植物神經(jīng)制劑反應(yīng)性改變異同，探討逼尿肌興奮性改變與神經(jīng)的關(guān)系；4、進行作用于肌細胞水平的鈣通道阻滯試驗，觀察不同亞型鈣通道阻滯劑對各組逼尿肌興奮及鈣震蕩的影響，探討逼尿肌興奮性改變與鈣通道改變的關(guān)系；5、免疫組化染色觀察各組逼尿肌縫隙連接蛋白Conn

8、nexin43改變，探討骶髓上損傷后逼尿肌興奮性改變與逼尿肌細胞間興奮傳導(dǎo)的改變的關(guān)系；6、免疫組化染色觀察各組逼尿肌肌動蛋白β-actin、Ⅲ型、Ⅰ型膠原纖維改變并探討其與逼尿肌順應(yīng)性改變的關(guān)系。 結(jié)果：1骶髓上損傷后膀胱均發(fā)生DH，膀胱順應(yīng)性降低，BOO后DI的發(fā)生率為68.7％，膀胱順應(yīng)性降低；2，DH組和DI組在體及離體膀胱均于較低的膀胱內(nèi)壓下即出現(xiàn)節(jié)律性收縮反應(yīng)，離體膀胱的收縮頻率明顯高于在體膀胱(P<0.05)，而正

9、常對照組在體及離體膀胱充盈測壓全過程無逼尿肌節(jié)律性收縮反應(yīng)；3 DH組及DI組離體逼尿肌條機械牽拉致其出現(xiàn)收縮時的最小張力明顯低于正常對照組，相同前負荷下的收縮頻率明顯高于正常對照組(P<0.05)；4高濃度氯化氨甲酰膽堿刺激逼尿肌產(chǎn)生的收縮力DH組、DI組、C組差異無顯著性；5高濃度去甲腎上腺素刺激逼尿肌產(chǎn)生的收縮力DH組、DI組、C組差異無顯著性；6高濃度三磷酸腺甘作用逼尿肌產(chǎn)生的收縮力DH組、DI組、C組差異無顯著性；7滴加高濃度

10、T型鈣通道阻滯劑咪拉地爾后DH組、DI組、C組逼尿肌條收縮頻率降低至相同水平，滴加高濃度L型鈣通道阻滯劑異搏定后各組收縮頻率下降相同；8 DH組及DI組逼尿肌細胞鈣振蕩頻率明顯高于C組(P<0.05)，滴加高濃度咪拉地爾后各組鈣振蕩頻率降低至相同水平，而滴加高濃度異搏定后各組鈣振蕩頻率下降相同；9與C組相比，DH組、DI組逼尿肌細胞間隙Ⅰ型、Ⅲ型膠原纖維、縫隙連接蛋白Connnexin43均增強，逼尿肌細胞內(nèi)肌動蛋白β-actin均增強

11、。 結(jié)論：骶髓上損傷后逼尿肌肌源性改變與BOO后的改變具有一致性：1骶髓上損傷后逼尿肌順應(yīng)性降低；2骶髓上損傷后逼尿肌發(fā)生繼發(fā)性改變，自身的興奮性增強，發(fā)生逼尿肌反射亢進；3骶髓上損傷后逼尿肌興奮性增強主要因T型鈣通道分布增多或性狀改變引起，L型鈣通道改變在DH發(fā)生中的作用不明顯；4骶髓上損傷后逼尿肌細胞間縫隙連接蛋白Connexin43表達增強，縫隙連接增多，細胞間興奮傳導(dǎo)加強，DH的發(fā)生也與此有關(guān)；5細胞間隙Ⅰ型、Ⅲ型膠原纖