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文檔簡介
1、視網(wǎng)膜變性是一類伴隨著視網(wǎng)膜細胞的壞死或凋亡的病變的總稱。但目前,這類疾病尚沒有有效的治療手段。所以,任何能夠防止這些病變的發(fā)生或能幫助視網(wǎng)膜重建的方法都可能成為臨床上有效的治療措施。
雖然已有的報道證實了來自胎兒的視網(wǎng)膜前體細胞(retinal progenitor cells,RPCs)移植治療視網(wǎng)膜變性類疾病的安全性和有效性,但是其來源始終限制了其應用。胚胎干細胞(embryonic stem cells,ESCs)是胚
2、胎著床前囊胚期的內細胞團在體外特定培養(yǎng)條件下建立的細胞系,具有自我更新的能力和發(fā)育全能性的特點。ESCs能夠分化成為各種類型的細胞,這使得它們具有巨大的研究價值,為臨床提供了充足的細胞來源。但同時,ESCs持續(xù)的自我更新能力和發(fā)育全能性,也使得細胞分化的高效性和細胞移植的安全性特別引起人們的關注。我的課題也是基于此,探討了胚胎干細胞移植治療中的相關問題。
首先,通過流式細胞分選,我們富集到Soxl陽性的神經(jīng)上皮細胞,提高了進一
3、步向視網(wǎng)膜方向分化的效率。同時,去除了分化細胞中未分化的ESCs的污染,避免了畸胎瘤的產(chǎn)生。但是,在61%的細胞移植組中,我們發(fā)現(xiàn)了過度增殖的神經(jīng)組織(neural overgrowth,NOG)。于是,我們通過全轉錄本芯片的檢測,發(fā)現(xiàn)canonical Wnt通路在ESC-RPCs中的異常激活。同時,我們的實驗證明通過抑制canonical Wnt通路,能夠顯著的促進ESC-RPCs進一步成熟,并使NOG的比率降低至3%。組織免疫組化
4、和視網(wǎng)膜電生理檢測結果表明,抑制canonical Wnt通路后ESC-RPCs能夠有效的整合到宿主視網(wǎng)膜中,形成突觸連接,并且?guī)椭拗骰謴鸵暪δ堋?br> 我們針對canonical Wnt通路對ESC-RPCs的分化和致瘤性的調控作用及其機制進行了深入的研究。結果表明,canonical Wnt通路可能通過調控Tcf1,影響Sox2和Nestin的表達水平并最終參與分化和腫瘤形成的調控。當我們在ESC-RPCs中,沉默Sox2和N
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