應(yīng)用病菌毒素篩選香蕉抗枯萎病突變體.pdf

1、以香蕉枯萎病菌(Fusalium oxysporum f sp．cubense)粗毒素為選擇壓力，結(jié)合組織培養(yǎng)技術(shù)，利用多種方案篩選香蕉抗枯萎病菌突變體，并對(duì)突變體再生苗與親本組培苗的抗病性和抗性生理生化基礎(chǔ)進(jìn)行比較。 在香蕉(MusaAAA )組織培養(yǎng)過(guò)程，將枯萎病菌粗毒素添加到組織培養(yǎng)基中。結(jié)果表明，毒素對(duì)香蕉組培芽的分化利存活具有較強(qiáng)的抑制作用，粗毒素的添加劑量與組培芽枯死率成正相關(guān)，致枯萎50％的粗毒素劑量為36.303

2、8 μg·mL<'-1>。 利用一步正篩選與多步正篩選分別獲得了抗病突變體。根據(jù)篩選過(guò)程中分生芽的存活率及抗病性鑒定結(jié)果，確定在半致死毒素劑量水平上連續(xù)2次篩選后存活的分生芽轉(zhuǎn)接到毒素劑量逐步提高的培養(yǎng)基中的多步篩選方案Ⅱ?yàn)樽罴押Y選方案?？共⌒澡b定結(jié)果表明，突變體再生苗的抗性水平比親本組培苗顯著提高，突變體再生苗對(duì)毒素的抗性程度明顯高于對(duì)病菌的抗性，突變體再生苗抗毒素能力的高低與抗病菌致病作用能力的高低并非完全一致，上述結(jié)果表明

3、了以毒素作為篩選壓力進(jìn)行香蕉抗枯萎病突變體篩選的有效性。 對(duì)毒素篩選獲得的突變體分生芽抗性分析結(jié)果表明，突變體分生芽雖然經(jīng)過(guò)連續(xù)5次繼代在不含毒素的培養(yǎng)基中，但其對(duì)毒素的抗性并沒有喪失，香蕉突變體分生芽的存活率均在80％以上，極顯著高于對(duì)照。這說(shuō)明采用多步篩選的方法誘導(dǎo)的香蕉分生芽，對(duì)毒素的抗性較強(qiáng)、具有穩(wěn)定性。 用毒素處理突變體及其親本組培苗，測(cè)定處理后不同時(shí)段蕉苗組織中保護(hù)性酶活性的變化狀況以探明突變體抗性變化的生理

4、基礎(chǔ)。測(cè)定結(jié)果表明，突變體再生苗植株組織內(nèi)的保護(hù)性酶活力顯著增強(qiáng)，其中SOD、CAT、PAL酶活性的變化趨勢(shì)基本一致，既先升高后降低，突變體植株的酶活性始終高于對(duì)照植株。MDA含量變化趨勢(shì)與保護(hù)性酶活性變化相反，先下降后上升，且對(duì)照上升的幅度高于突變體。 突變體分生芽的細(xì)胞膜透性低于親本的細(xì)胞膜透性表明，經(jīng)過(guò)毒素篩選的分生芽，其細(xì)胞膜耐毒素的能力得到提高。POD同工酶電泳分析表明，突變體蕉苗沒有新的酶帶產(chǎn)生，但是有的條帶比對(duì)照顏