聯(lián)合使用吡哆胺和替米沙坦對自發(fā)性高血壓大鼠心肌重塑的影響.pdf

1、目的：通過研究聯(lián)用吡哆胺和替米沙坦對大鼠血壓水平及心肌細(xì)胞及胞外基質(zhì)的影響，探討心肌重塑與心肌細(xì)胞肥大、增生、基質(zhì)纖維化水平的關(guān)系；探討晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)及其受體(RAGE)與腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的關(guān)系；探討AGEs-RAGE與RAS對心肌重塑的影響及聯(lián)用吡哆胺和替米沙坦的干預(yù)效果。
　　 方法：選取22周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)48只，作為高血壓實驗組，每組12只，隨機分為4組：高血壓對照組(HC

2、組)蒸餾水2ml/d灌胃一次；替米沙坦組(T組)替米沙坦6mg/kg/d灌胃1次；吡哆胺組(P組)鹽酸吡哆胺200 mg/kg/d灌胃1次；聯(lián)合治療組(TP組)替米沙坦 6mg/kg/d及鹽酸吡哆胺 200 mg/kg/d灌胃1次,同周齡雄性威斯塔京都大鼠(WKY)13只，為正常對照組(NC組)蒸餾水2ml/d灌胃一次。每2周檢測大鼠尾動脈收縮壓1次。干預(yù)16周后，心臟二維超聲測量舒張末期室間隔厚度(IVST)、舒張末期左室后壁厚度 (

3、LVPWTd)、左室射血分?jǐn)?shù)(EF[％])。4[％]水合氯醛麻醉、開胸，取動脈血分離血清，競爭性ELISA法測定血清AGEs，放射免疫法測血清血管緊張素II(AngII)，化學(xué)法測血清一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。計算心肌體重比。HE染色光鏡下觀察心肌組織。天狼猩紅-苦味酸染色計算心肌膠原容積分?jǐn)?shù)。免疫組化SP法測細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1、2(ERK1、ERK2)的蛋白表達。實時定量 PCR檢測心肌的RAGE、血管緊張素1

4、型受體(AT1)的mRNA水平。
　　 結(jié)果：
　　 1、大鼠尾動脈收縮壓結(jié)果：
　　 與NC組相比HC組收縮壓明顯升高(P<0.01)；與HC組相比T組、TP組收縮壓下降(P<0.01)，P組收縮壓無明顯改變(P>0.05)；T組與TP組之間收縮壓差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 2、血清生物學(xué)指標(biāo)檢測結(jié)果：
　　 ①與NC組相比HC組血清NO、SOD濃度較低(P<0.05)；與HC組相

5、比T組、P組、TP組血清NO、SOD濃度升高(P<0.01)；與 T組相比TP組血清NO濃度進一步升高(P<0.05)：與 P組相比TP組血清SOD濃度進一步升高(P<0.05)。②與NC組相比HC組血清AGEs較高(P<0.01)；與HC組相比T組、P組、TP組血清AGEs濃度降低(P<0.01)；與 T組、P組相比TP組血清AGEs濃度進一步降低(P<0.05)。③與NC組相比HC組血清AngII濃度較高(P<0.01)，T組與HC

6、組相比血清AngII濃度升高(P<0.05)，P組與HC組相比血清AngII濃度降低(P<0.05)，TP組與T組相比血清AngII濃度降低(P<0.05)。
　　 3、心肌體重比：
　　 與NC組相比HC組心肌體重比增高(P<0.01)；與HC組相比T組、P組、TP組心肌體重比降低(P<0.01)；與 T組、P組相比TP組心肌體重比進一步降低(P<0.05)。
　　 4、二維超聲結(jié)果：
　　 與NC組相

7、比HC組IVSTd、LVPWTd增高(P<0.01)；與HC組相比T組、P組、TP組IVSTd、LVPWTd降低(P<0.01)；與 T組、P組相比TP組IVSTd、LVPWTd進一步降低(P<0.05)。與NC組相比HC組EF％降低(P<0.01)；T組、P組、TP、HC組的EF％無明顯區(qū)別(P>0.05)。
　　 5、光鏡下心肌組織觀察結(jié)果：
　　 NC組心肌細(xì)胞排列整齊，細(xì)胞無明顯增生肥大，細(xì)胞核大小較均一，細(xì)胞外

8、膠原纖維增生不明顯。HC組心肌細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞增生肥大，細(xì)胞外膠原纖維增生增多，基質(zhì)增加，T組、P組、TP組心肌細(xì)胞排列較HC組整齊，細(xì)胞增生肥大較HC組改善，細(xì)胞外膠原纖維增生情況較HC組改善。
　　 6、心肌膠原容積分布：
　　 與NC組相比HC組心肌膠原容積分布增高(P<0.01)；與HC組相比T組、P組、TP組心肌膠原容積分布降低(P<0.01)；與 T組、P組相比TP組心肌膠原容積分布進一步降低(P<0.05

9、)。
　　 7、免疫組化ERK1、ERK2結(jié)果：
　　 與NC組相比HC組ERK1、ERK2光密度值增高(P<0.01)；與HC組相比T組、P組、TP組ERK1，ERK2光密度值降低(P<0.01)；與 T組、P組相比TP組ERK1，ERK2光密度值進一步降低(P<0.05)。
　　 8、實時定量 PCR檢測心肌組織AT1、RAGE mRNA結(jié)果：
　　 與NC組相比HC組AT1、RAGE mRNA水平增

10、高(P<0.01)；與HC組相比T組、P組、TP組AT1、RAGE mRNA水平降低(P<0.01)；與 T組、P組相比TP組AT1、RAGE mRNA水平進一步降低(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、高血壓病理狀態(tài)下SHR體內(nèi)AGEs負(fù)載量較WKY增高。
　　 2、心肌細(xì)胞增生肥大，I型、III型膠原蛋白的增多是心肌重塑的重要因素之一。
　　 3、 AGEs-RAGE和RAS可以相互作用并通過E