2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、多殺菌素(spinosyn)是由刺糖多孢菌(Saccharopolysporaspinosa)經(jīng)有氧發(fā)酵產(chǎn)生的一類新型大環(huán)內(nèi)酯類化合物。它是一種低毒、低殘留、對昆蟲天敵安全、作用機(jī)理獨特的天然殺蟲劑。本試驗通過建立刺糖多孢菌原生質(zhì)體制備再生最佳條件,運(yùn)用抗性耐受突變及基因組重排技術(shù),開展了刺糖多孢菌高產(chǎn)多殺菌素的菌株選育工作。 試驗結(jié)果顯示S.spinosa原生質(zhì)體制備的最佳條件為250ml三角瓶(帶有不銹鋼彈簧)裝50ml含1

2、0%蔗糖的TSB培養(yǎng)基、孢子懸液接種,28℃,200r/min培養(yǎng)48h;3000r/min收集菌絲體并用0.3mol/L蔗糖清洗一次;用含3mg/mL溶菌酶P緩沖液懸浮菌絲體,32℃下處理100min;M-G培養(yǎng)是最合適的原生質(zhì)體再生培養(yǎng)基;原生質(zhì)體可在-70℃保存。 以刺糖多孢菌N229-17(多殺菌素產(chǎn)量334μg/mL)和C131-24(多殺菌素產(chǎn)量279μg/mL)為出發(fā)菌株,進(jìn)行原生質(zhì)體亞硝酸和微波誘變,篩選Str+

3、和Gen+抗性菌株,結(jié)果顯示菌株的抗性水平與多殺菌素產(chǎn)量呈正相關(guān),并得到了菌株Y23(Str+Gen-)和W16(Str-Gen+)。通過Y23和W16進(jìn)行原生質(zhì)體融合研究試驗,結(jié)果顯示40%的PEG1000對原生質(zhì)體融合有很好的促進(jìn)作用。以Y23、W16、P131、U108-41和N613為親本菌株進(jìn)行基因組重排研究,結(jié)果顯示隨著重排深入,高產(chǎn)菌株出現(xiàn)頻率增加。通過3輪Genomeshuffling處理,篩選獲得菌株F113(528μ

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